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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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杨仔儿

木虫 (著名写手)

[求助] NEB公司的酶可以酶切过夜吗? 已有8人参与

酶切3个小时,没有切开,不知道是什么原因?
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lxzk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
大部分可以,有TIMESAVER标记的都可以,楼上说的很明白了。不过三小时切不开你应该考虑一下位点有没有错,条件有没有问题(比如有的酶不是37度),甚至酶有没有过期失活。
4楼2015-07-14 00:09:43
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yangjingjing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以,我经常切过夜,4h也是可以的
努力打败一切
13楼2015-07-15 12:24:56
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普通回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有些可以有些不行,去NEB网站上查查看
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2015-07-13 17:19:05
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nonglong1

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-13 23:11:46
酶切时间长了主要担心星活性,即会识别不同序列剪切。具体的酶性质不一样,有些可能在甘油浓度高或离子浓度高或长时间酶切产生星活性。所以需要看用的什么酶。另外,如果是双酶切最好保证两个酶切位点有一定距离,选合适的buffer也很重要。
good luck!
植物学
3楼2015-07-13 18:29:25
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fisherrx

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
HF的都可以,普通的注意别甘油含量别超过体积5%,基本没什么问题。
5楼2015-07-14 00:30:53
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zhouting816

金虫 (小有名气)

xmcll

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
以前做双酶切都是3~5个小时
6楼2015-07-14 09:14:45
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杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2015-07-13 17:19:05
有些可以有些不行,去NEB网站上查查看

切了6个小时,切开了,谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-07-14 09:38:54
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杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by nonglong1 at 2015-07-13 18:29:25
酶切时间长了主要担心星活性,即会识别不同序列剪切。具体的酶性质不一样,有些可能在甘油浓度高或离子浓度高或长时间酶切产生星活性。所以需要看用的什么酶。另外,如果是双酶切最好保证两个酶切位点有一定距离,选 ...

6个小时切开了,谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2015-07-14 09:40:49
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杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lxzk at 2015-07-14 00:09:43
大部分可以,有TIMESAVER标记的都可以,楼上说的很明白了。不过三小时切不开你应该考虑一下位点有没有错,条件有没有问题(比如有的酶不是37度),甚至酶有没有过期失活。

TIMESAVER是什么意思?我切来了,6个小时,谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2015-07-14 09:41:43
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杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by fisherrx at 2015-07-14 00:30:53
HF的都可以,普通的注意别甘油含量别超过体积5%,基本没什么问题。

谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2015-07-14 09:41:55
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