2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-05 15:55:33
这两个酶可以用同一个buffer切。如果你想用他们各自的buffer做酶切，可以看一下两个buffer成分的区别，如果可以简单的补足的话，中间就不用回收，做好一个酶切后加入不足的成分建立第二种酶切体系。否则，先用一个酶 ...

3楼: Originally posted by asdkingstar at 2012-10-06 10:12:59
楼主你现在做的是ARDRA分型么？你之前的双酶切是直接加入两种酶和通用buffer进行没切的吗？具体的加样体系是什么？

4楼: Originally posted by 策马入林 at 2012-10-06 14:01:20
嗯，我以前用的Kbuffer作为共同buffer来切的，效果还是不错的，用的是takara的酶，我看了下neb的酶上标的是这两个酶得分步酶切，不过我也不清楚可靠不。我再仔细研究下他们各自buffer有什么不同吧，先谢过了哈，那 ...

5楼: Originally posted by 策马入林 at 2012-10-06 14:05:07
不是，我只是将我的含有酶切位点的pcr纯化产物连接进t载体保存，方便后面直接酶切获取目的基因，用于表达
之前酶切一直都是直接加入两种酶和通用buffer进行酶切的
因为要进行目的片段回收所以体系一般用的是：
...

7楼: Originally posted by asdkingstar at 2012-10-07 19:04:07
这个简单，楼主你看那个说明书上面两种酶切的的温度是否相同？还有说明书后面两种酶在不同buffer中的酶切效率是多少？如果有一种buffer可以使两者酶切效率都大于50%就可以同时酶切，就像你之前那样，最好识大体系。...