应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切温度控制
81/1返回列表
查看: 2690  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

一度冰火

新虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切温度控制

本人做双酶切是碰到两种酶的酶切温度不一样，一种是37度，一种是30度，请问大侠们我该如何调温度，是用30度呢还是用30和37的平均值啊，还有我用质粒双酶切后跑出条带发现有电泳图上的质粒上有蛋白质污染，请问各位大侠双酶切时有遇到这种现象吗，该怎么处理呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
快来找我吧！
1楼 2012-06-13 15:44:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihao1988903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酶切温度是指最佳酶切时的温度，可以综合考虑下两种酶温度变化的影响，进而选择合适的温度。
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-13 16:21:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
选择30度比较好点。选37度，可能其中一个酶会不稳定，容易失活或者出现星活性。
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-13 16:56:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whwshzdx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-06-19 13:43:07
takara上有双酶切的表都是在37度，30度的酶是Bamh1吗，Bamh1酶切效果很好（37度），也可以分步酶切你的东西量多的话酶切要延长时间
赞一下 回复此楼
4楼2012-06-17 00:44:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一度冰火

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by whwshzdx at 2012-06-17 00:44:58
takara上有双酶切的表都是在37度，30度的酶是Bamh1吗，Bamh1酶切效果很好（37度），也可以分步酶切你的东西量多的话酶切要延长时间

呵呵，我的其中一个内切酶就是BAMH1 的，那我试下37度，谢谢了
赞一下 回复此楼
快来找我吧！
5楼2012-06-18 16:57:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

suifeng91

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

先低温后高温(buffer不同可抽提或跑胶分离纯化)；
先低盐后高盐。
赞一下 回复此楼
人生不是一场物质的盛宴，而是一次灵魂的修炼，使它在谢幕之时比开幕之初更为高尚。
6楼2012-06-18 22:45:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

angie8610

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果可以用同一种buffer的话可以先30度切后在不加另一种酶37度切，我是这样做的！
赞一下 回复此楼
新手上路，多多关照！
7楼2012-08-28 16:12:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

84146922

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

建议先低温后高温
先30度切，再37度切~
赞一下 回复此楼
8楼2012-08-28 21:40:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 一度冰火 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291分工科求调剂 +3 science饿饿 2026-03-01 3/150 2026-03-01 07:49 by ms629
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +5 Soliloquy_Q 2026-02-28 8/400 2026-02-28 23:36 by xyx2012xyx
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料学调剂 +5 提神豆沙包 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:34 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 284求调剂 +4 天下熯 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:13 by gaoxiaoniuma
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 寻找调剂 +3 LYidhsjabdj 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:59 by miniwendy
[基金申请] 面上可以超过30页吧？ +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭