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有关NEB内切酶NdeI和XhoI的双酶切问题 已有4人参与
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| 有用过NEB内切酶NdeI和XhoI双酶切的大侠吗，请高手指点，用该两种酶来切空载体，需要多长时间。如果切目的片段呢，我的目的片段的两个酶切位点前都只有两个保护碱基，会不会效率很低，需要切多长时间？ |
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kx444555: 金币+3, 很详细 2013-03-18 18:07:38
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kx444555: 金币+3, 很详细 2013-03-18 18:07:38
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一般来说，两个保护碱基就足够了。 关于双酶切设计，我建议你使用double digestion designer，http://www.bioinfomatics.cn/enzyme/showresult.php ，可以根据你质粒或者PCR产物的大小和质粒的质量，精确计算完全酶切所需要的酶量，不用担心酶切不完全，当然，前提是你的酶保存恰当，没有失活，质粒的质量也没问题。 祝好运！ |
2楼2013-03-13 22:00:10
gyesang
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