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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wolaiyefeng

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 双酶切的选择

双酶切时,两个酶的反应缓冲液不同可以吗?其他的如温度(都为37度)、停止缓冲液都相同。急!!!
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wolaiyefeng

铁杆木虫 (小有名气)

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流。回答问题选择应助哦,不然楼主无法加分 2011-05-10 08:41:58
附加:我目前选择的是EcoRV和Bpu1102I两种酶,两者的反应缓冲液不同,前者是H,后者是Basal+BSA。
2楼2011-05-08 20:16:59
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zlu520

至尊木虫 (职业作家)

限制人

【答案】应助回帖

wolaiyefeng(金币+3): 知道了,谢了哈! 2011-05-08 22:11:38
可以单独酶切啊。。
无完人!
3楼2011-05-08 20:48:47
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zhaoboxin001

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-05-09 08:01:43
你可以通过网站或者这两种酶自带的protocol查找一下兼容的缓冲液,不过,你这两种好像各种缓冲液的兼容度都不大好,建议单酶切后再进行另一种酶的酶切。貌似你的酶是TAKARA的,其实MBI和NEB的部分酶有超兼容的缓冲液,就是所有的酶都可以用同一种缓冲体系,可以试试换个牌子。
4楼2011-05-08 20:49:37
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keke0812

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用两个酶兼容的缓冲液或者单酶切,单酶切后要去磷酸化.
5楼2011-05-08 21:36:31
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475502411

铜虫 (著名写手)

还是单酶切吧,超兼容buffer也不是太好
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
6楼2011-05-08 22:36:02
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫

引用回帖:
Originally posted by 475502411 at 2011-05-08 22:36:02:
还是单酶切吧,超兼容buffer也不是太好

各自单酶切,还是很好用的。
梦在路就在!
7楼2011-05-09 05:48:42
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-09 11:46:42
我双酶切的时候,虽然买来搭配的buffer不一样 但是在不同的buffer里面反应效率都是百分之百,你换换公司的试试 比如takara的
8楼2011-05-09 10:05:18
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 稍加鼓励 2011-05-10 08:42:24
其他公司的不了解,

宝生物的目录前几页有个表,可以查的,可选择最优的Buffer
千万不要因为走的太久,而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
9楼2011-05-09 23:56:18
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