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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切的选择
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wolaiyefeng

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 双酶切的选择

双酶切时，两个酶的反应缓冲液不同可以吗？其他的如温度（都为37度）、停止缓冲液都相同。急！！！
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1楼 2011-05-08 20:11:40
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keke0812

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用两个酶兼容的缓冲液或者单酶切,单酶切后要去磷酸化.
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5楼2011-05-08 21:36:31
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wolaiyefeng

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流。回答问题选择应助哦，不然楼主无法加分 2011-05-10 08:41:58
附加：我目前选择的是EcoRV和Bpu1102I两种酶，两者的反应缓冲液不同，前者是H，后者是Basal+BSA。
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2楼2011-05-08 20:16:59
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zlu520

至尊木虫 (职业作家)

限制人

【答案】应助回帖

wolaiyefeng(金币+3): 知道了，谢了哈！ 2011-05-08 22:11:38
可以单独酶切啊。。
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无完人！
3楼2011-05-08 20:48:47
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zhaoboxin001

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-05-09 08:01:43
你可以通过网站或者这两种酶自带的protocol查找一下兼容的缓冲液，不过，你这两种好像各种缓冲液的兼容度都不大好，建议单酶切后再进行另一种酶的酶切。貌似你的酶是TAKARA的，其实MBI和NEB的部分酶有超兼容的缓冲液，就是所有的酶都可以用同一种缓冲体系，可以试试换个牌子。
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4楼2011-05-08 20:49:37
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