24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lezhen_22

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 9.5
帖子: 22
在线: 10.9小时
虫号: 2185128
注册: 2012-12-13
专业: 生物化学

[交流] 有关NEB内切酶NdeI和XhoI的双酶切问题已有4人参与

有用过NEB内切酶NdeI和XhoI双酶切的大侠吗，请高手指点，用该两种酶来切空载体，需要多长时间。如果切目的片段呢，我的目的片段的两个酶切位点前都只有两个保护碱基，会不会效率很低，需要切多长时间？

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

关于XhoI和SacI双酶切的问题已经有8人回复
双酶切后载体片段变小已经有8人回复
双酶切啥都没有？已经有10人回复
Hind111 与 Not1双酶切请教急急急！！！已经有13人回复
表达载体双酶切已经有9人回复
双酶切，体系，切不出来已经有10人回复
关于酶切的小问题已经有10人回复
重组质粒双酶切问题已经有5人回复
双酶切体系是什么意思已经有7人回复
双酶切连接表达载体，两个月都没做出来，问题到底出在哪里呢~？求指点已经有52人回复
求助！请问 NdeI 和EcoRI 同时做酶切可以吗？已经有3人回复
双酶切的选择已经有8人回复
【求助/交流】关于双酶切已经有6人回复
【求助/交流】双酶切载体总是切不完全已经有11人回复
【求助/交流】双酶切求助已经有19人回复
【求助/交流】NdeI/XhoI和BglII/XhoI这两对内切酶效率如何？已经有17人回复
【求助/交流】请教NEB的pmeI的酶切体系已经有7人回复
求双酶切，分步酶切的具体操作步骤已经有7人回复

1楼 2013-03-13 15:38:45

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

26264716

铁虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 587.5
帖子: 93
在线: 61.8小时
虫号: 2041095
注册: 2012-10-03
性别: GG
专业: 基因组学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

2楼: Originally posted by 酶切专家 at 2013-03-13 22:00:10
一般来说，两个保护碱基就足够了。
关于双酶切设计，我建议你使用double digestion designer，http://www.bioinfomatics.cn/enzyme/showresult.php
，可以根据你质粒或者PCR产物的大小和质粒的质量，精确计算完全 ...

这个只有两周的免费使用啊。。。

赞一下

回复此楼

苦，才是人生

4楼2013-03-15 12:52:24

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 7 个回答

酶切专家

金虫 (小有名气)

MolEPI: 2
应助: 96 (初中生)
金币: 1610.8
红花: 4
帖子: 149
在线: 41.3小时
虫号: 1648414
注册: 2012-02-27
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 很详细 2013-03-18 18:07:38

一般来说，两个保护碱基就足够了。
关于双酶切设计，我建议你使用double digestion designer，http://www.bioinfomatics.cn/enzyme/showresult.php
，可以根据你质粒或者PCR产物的大小和质粒的质量，精确计算完全酶切所需要的酶量，不用担心酶切不完全，当然，前提是你的酶保存恰当，没有失活，质粒的质量也没问题。
祝好运！

赞一下

回复此楼

2楼2013-03-13 22:00:10

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖