应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » XcmI酶切不开的可能原因
91/1返回列表
查看: 2430  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小兜儿

铁虫 (初入文坛)

[求助] XcmI酶切不开的可能原因

目前在切一个pMD18T和PCR产物连接的重组质粒，上面有两个我加入的XcmI位点，中间隔了12bp长度碱基，10ul酶切体系，37℃2h，按说明书的体系要求。
       正常如果酶切成功我觉得电泳结果应该是分明的一条亮带，可是却是两条带，带的位置也不对。如果是没切开的话跟对照质粒还真不一样。酶才买的，应该不存在失效的问题，NEB公司。
       提取完质粒后用RNA酶水溶解，有没有可能是RNA酶的干扰呢？
       有没有哪位大人用过这个酶？

[ Last edited by 小兜儿 on 2011-10-10 at 16:00 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-10 15:04:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小兜儿

铁虫 (初入文坛)
没人做过吗？自己顶一下……
赞一下 回复此楼
2楼2011-10-11 10:42:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子

【答案】应助回帖

呵呵 可以查阅下18T上面是否带有XcmI位点
赞一下 回复此楼
可以用QQ找我……
3楼2011-10-11 10:57:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

多切一会儿，此酶活力低
赞一下 回复此楼
4楼2011-10-11 11:14:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小兜儿

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 红多多 at 2011-10-11 10:57:38:
呵呵 可以查阅下18T上面是否带有XcmI位点

没有的……
回复此楼
5楼2011-10-11 12:21:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小兜儿

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by doublehelix at 2011-10-11 11:14:41:
多切一会儿，此酶活力低

2个小时怎么样？要不要过夜切呢？
赞一下 回复此楼
6楼2011-10-11 12:21:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+1): 鼓励应助！ 2011-10-14 18:07:36
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-10-14 18:08:57
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小兜儿 at 2011-10-11 12:21:43:
2个小时怎么样？要不要过夜切呢？

我们室一般过夜 16度
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2011-10-11 14:55:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小兜儿

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
西瓜: 可能是提得不纯，乙醇或苯酚氯仿残留都会影响酶切的。 2011-10-14 18:07:41
wanhscn(金币+4): 鼓励新虫回贴！鼓励多来分子生物版！ 2011-10-14 18:07:56
好像是质粒出现的问题……重新提取了一次切开的条带就很清晰了，好奇怪到底是哪步能让我质粒有问题……
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2011-10-14 10:26:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好low

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小兜儿 at 2011-10-14 10:26:08
好像是质粒出现的问题……重新提取了一次切开的条带就很清晰了，好奇怪到底是哪步能让我质粒有问题……

貌似我也遇到了这样的情况，可是质粒怎么会有问题的呢？？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2017-04-29 23:54:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小兜儿 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +16 Ldrop2023 2026-08-13 20/1000 2026-08-20 11:07 by xskun
[基金申请] 言之凿凿，8月21号(明天)放榜 +12 医学老男孩 2026-08-20 14/700 2026-08-20 10:53 by ran2233
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +13 基诺咪客 2026-08-17 17/850 2026-08-20 10:43 by wangyue2015
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 21/1050 2026-08-20 10:37 by Vivilian
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 125/6250 2026-08-20 09:02 by 医学老男孩
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭