24小时热门版块排行榜    

查看: 2391  |  回复: 7

kuangxia

铜虫 (初入文坛)

[求助] 我做酶切电泳自制marker开始都挺好,后来跑不开了。

我用Alu1,酶切pFCB-31来制作marker。酶切24小时后,靠点样孔出现了9条带,目的是出现20条带。又加入10u酶切后,出现了所需的20条带。加入loading buffer和EDTA常温下保存,过了个周末后再来电泳的时候,全在一起了,分不开了,聚集在距点样孔较远的地方,拖带拖在一起了,后来再跑,也都跑不出来了。
实验方法和条件是正确的,因为我后来又重做了marker的,一样的保存方式,现在用起来很正常,20条带。
请问各位,出现上面那种情况有哪些可能,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

自己做marker,好牛啊,共享下protocol啊
2楼2011-09-21 17:00:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励 2011-09-22 12:30:29
我们也是自己做Marker的,不是整数带!
可能在跑完胶鉴定完后,过了很久才加loading buffer的,切光了!
真相是最大的奢侈品
3楼2011-09-22 08:49:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kuangxia

铜虫 (初入文坛)

wanhscn: 待高手回答! 2011-09-22 10:02:38
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanhscn at 2011-09-22 08:49:33:
我们也是自己做Marker的,不是整数带!
可能在跑完胶鉴定完后,过了很久才加loading buffer的,切光了!

跑完胶鉴定以后就拿出来加了loading buffer和EDTA啊,而且后来又做的那次结果挺好的,现在还一直在用那个marker,还是很稳定的。
4楼2011-09-22 09:11:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liukun261

禁虫 (小有名气)

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励新虫发帖! 2011-10-06 11:54:09
本帖内容被屏蔽

5楼2011-10-06 11:36:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kuangxia

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liukun261 at 2011-10-06 11:36:31:
怎样自制marker    请教???

就用限制性内切酶酶切确定的质粒就行了。
6楼2011-10-12 16:11:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

这样做成本是不是比买还要高啊?
在等待中涅槃重生
7楼2011-10-12 17:57:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

自制marker!!!打老板PP,或者让老板给币币!
致良知
8楼2011-10-12 18:18:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kuangxia 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 123/6150 2026-08-19 23:44 by stan_et
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +13 kkkl_v 2026-08-19 13/650 2026-08-19 22:37 by 宝贝虫子
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见