应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我做酶切电泳自制marker开始都挺好，后来跑不开了。
51/1返回列表
查看: 2459  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

kuangxia

铜虫 (初入文坛)

[求助] 我做酶切电泳自制marker开始都挺好，后来跑不开了。

我用Alu1，酶切pFCB-31来制作marker。酶切24小时后，靠点样孔出现了9条带，目的是出现20条带。又加入10u酶切后，出现了所需的20条带。加入loading buffer和EDTA常温下保存，过了个周末后再来电泳的时候，全在一起了，分不开了，聚集在距点样孔较远的地方，拖带拖在一起了，后来再跑，也都跑不出来了。
实验方法和条件是正确的，因为我后来又重做了marker的，一样的保存方式，现在用起来很正常，20条带。
请问各位，出现上面那种情况有哪些可能，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-09-21 08:38:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kuangxia

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by liukun261 at 2011-10-06 11:36:31:
怎样自制marker    请教？？？

就用限制性内切酶酶切确定的质粒就行了。
赞一下 回复此楼
6楼2011-10-12 16:11:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
自己做marker，好牛啊，共享下protocol啊
赞一下 回复此楼
2楼2011-09-21 17:00:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励 2011-09-22 12:30:29
我们也是自己做Marker的，不是整数带！
可能在跑完胶鉴定完后，过了很久才加loading buffer的，切光了！
赞一下(1人) 回复此楼
真相是最大的奢侈品
3楼2011-09-22 08:49:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kuangxia

铜虫 (初入文坛)
wanhscn: 待高手回答！ 2011-09-22 10:02:38
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanhscn at 2011-09-22 08:49:33:
我们也是自己做Marker的，不是整数带！
可能在跑完胶鉴定完后，过了很久才加loading buffer的，切光了！

跑完胶鉴定以后就拿出来加了loading buffer和EDTA啊，而且后来又做的那次结果挺好的，现在还一直在用那个marker，还是很稳定的。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-22 09:11:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭