| 查看: 2226 | 回复: 6 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
提取质粒出现杂条带。
|
|||
|
大家好。我将我的目的片段3000bp 连入我的载体7000bp。连接方式是单酶切连接。载体经过去磷酸化处理。提取质粒后跑出来的电泳图如图所示。 提取质粒之前已经做过菌落PCR。所以这次是将菌落PCR得到的阳性菌进行抽提质粒。发现质粒的位置五花八门。有的比对照质粒还要小。有的还有很多条带。 不知道怎么回事。 第一道为7000bp对照质粒。  捕获.PNG |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有279人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 质粒PCR定点突变之后跑完的电泳图几乎看不到条带，能帮我分析下可能原因么？
已经有6人回复
- 提取的质粒中的杂带不知道是什么
已经有6人回复
- 菌落PCR有目的条带，质粒提取后质量良好，可是质粒PCR却没有目的条带
已经有4人回复
- 转化时，长出白色单菌落，菌落ＰＣＲ后有条带，在培养，提质粒，没有条带，怎么回事
已经有4人回复
- 测序正确，但是酶切没有条带，而且重组质粒位置不对
已经有3人回复
- 如何检测目的片段转没转到质粒上？
已经有16人回复
- 菌落PCR有目的条带，重组质粒提取PCR却没条带，请问是什么原因？
已经有13人回复
- 为什么我提的质粒只有一条带？
已经有10人回复
- 如何获取目的质粒？
已经有8人回复
- 提取质粒遇到多条带，求助
已经有19人回复
- 请大家帮我分析下我提的质粒怎么这么多条带呀?
已经有10人回复
- 求助——质粒大提跑胶成这样
已经有26人回复
- 提取重组质粒进行双酶切之后什么条带也没有，怎么回事？？
已经有7人回复
- 质粒快抽有条带，提取时却没有了，什么问题啊？
已经有15人回复
- 提取质粒之后又三条带, 需要切胶回收未开环DNA再进行酶切吗?
已经有10人回复
- 大提质粒遇到的问题
已经有10人回复
- 质粒提取有白色沉淀，跑胶却没条带，啥原因？
已经有24人回复
- 菌液PCR没东西，但是提完质粒能跑出来条带，为什么啊？
已经有16人回复
- 提取的质粒跑出四条或者五条带，但酶切后只有一条带，是不是我的质粒污染了
已经有18人回复
- 质粒提取，超螺旋前面还有一条带，怎么回事？
已经有18人回复
- 提质粒出现4条带？
已经有15人回复
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
- 质粒提取琼脂糖电泳的3个条带，到底每条是什么？
已经有15人回复
- 【求助/交流】求助、质粒酶切没有条带？
已经有18人回复
3楼2015-07-05 15:12:39
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
朱振刚: 金币+1 2015-07-05 17:04:27
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
朱振刚: 金币+1 2015-07-05 17:04:27
|
第一，质粒电泳出现三条带，很正常，最快的那条是质粒超螺旋，中间的是质粒本身，最慢的是质粒的复制中间体。 第二，目的质粒应该是10000bp，我看第三泳道可以考虑测序下。 第三，不知道你菌落pcr用的是什么引物。单酶切一般引物是要用质粒上的一条和目的基因上的一条引物进行pcr反应的。 第四，酶切之后可能马上又自己连回去了，或者去磷酸化不完全，都是载体自连的可能原因。 第五，很前面的那条带不知道是啥质粒，会不会你的3000bp中有复制子，3000bp的自连了呢。或者，你的酶加多了，信号活性，乱切。 |
2楼2015-07-05 15:10:23
4楼2015-07-05 17:08:04
5楼2015-07-05 17:09:34
10