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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提质粒出现4条带？
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笔冰河

银虫 (小有名气)

[求助] 提质粒出现4条带？

如图，1，2道为插入不同片段的质粒电泳图（试剂盒提质粒）；3,4道分别为1,2道质粒的酶切图，为什么质粒电泳会有四条带？第三道酶切多出的一条带是什么？
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1楼 2011-10-22 15:51:43
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zc10052157

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+1): 鼓励应助！认真回帖奖励更多！ 2011-10-22 21:19:03
wanhscn(金币+1): 鼓励应助！认真回帖奖励更多！ 2011-10-22 21:19:03
是不是混了什么东西在里面   这个电泳看着是跑过头了   既然酶切出来条带了  应该是没有问题吧
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hold住
2楼2011-10-22 20:44:04
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笔冰河

银虫 (小有名气)
提了很多次，每次都是4条，最上面那条很奇怪
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3楼2011-10-23 15:18:45
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匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★ ★
西瓜(金币+3): 斑斑出手了！哈哈~ 2011-10-23 23:53:25
本帖仅楼主可见
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4楼2011-10-23 18:31:32
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振子

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good! 2011-10-23 23:53:39
这个很正常吧，我有段时间提质粒也这样，说是加入药品后摇得太剧烈，把质粒摇断了，但我觉得是摇菌的过程步骤什么的出问题，具体的还得看自己的手法，有人提的话让人帮忙带一个看看是不是自己手法的问题，很难说得清楚
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5楼2011-10-23 21:11:38
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振子

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个很正常吧，我有段时间提质粒也这样，说是加入药品后摇得太剧烈，把质粒摇断了，但我觉得是摇菌的过程步骤什么的出问题，具体的还得看自己的手法，有人提的话让人帮忙带一个看看是不是自己手法的问题，很难说得清楚
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6楼2011-10-23 21:12:17
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evazxm

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

笔冰河(金币+1): 2011-10-25 09:16:52
我前段时间也遇到和楼主一样的问题，质粒本身出现4条带还说的过去，但是酶切之后如果得到的不是相应的条带数目和大小的话，那可能质粒本身污染了，具体原因不太清楚，不过可以重新摇菌再抽抽看
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7楼2011-10-24 10:51:04
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保护你的大树

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有可能菌液都是污染了的，转化的时候质粒不纯或者连接的时候不纯导致的，如果你不放心还是在目的位置切下来胶回收然后再转化试试。
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8楼2011-10-24 10:58:07
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lishuiqing

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我觉着断裂情况不大，质粒提取蛮抗断裂的，不像植物基因组。
从 1， 2 看，不至两条带，应该是菌污染吧，试剂盒提取不至一种质粒。
酶切肯定五花八门。
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9楼2011-10-24 15:29:40
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lishuiqing

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

笔冰河(金币+1): 2011-10-25 09:17:10
引用回帖:
9楼: Originally posted by lishuiqing at 2011-10-24 15:29:40:
我觉着断裂情况不大，质粒提取蛮抗断裂的，不像植物基因组。
从 1， 2 看，不至两条带，应该是菌污染吧，试剂盒提取不至一种质粒。
酶切肯定五花八门。

我说错了，我问了高手。从1 ，2 来看应该是质粒断裂。呈不同片段线性，
酶切有可能就切了一处，另一处是断链。
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10楼2011-10-24 15:44:21
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