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杨玉5352

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】提质粒后跑的电泳图 已有6人参与



             用TAKARA试剂盒提得质粒,大小倒是差不多,就不不知道为什么那后面的拖尾是怎么回事,希望大家给分析分析,谢谢了。
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飞侠8683

新虫 (小有名气)

提取时DNA发生断裂


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
应该是提取时有DNA发生断裂
2楼2010-05-13 16:41:02
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liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
基因组的污染,~一般不会影响,你最好跑个酶切。质粒不酶切,我从来没听过能判断大小~
3楼2010-05-13 16:46:05
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cqyniu

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
应该是有DNA的污染,找一个酶进行一下单酶切,再进行电泳,才能确定质粒的条带大小的,不然不准确的。
4楼2010-05-13 21:07:50
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杨玉5352

木虫 (小有名气)

提质粒后跑的电泳图 和酶切图



以上是我最新的酶切后电泳图,不知到为什么,酶切后的条带干干净净的就一条条带。酶切中DNA浓度是质粒浓度的三分之一。



请大家给分析一下质粒后面那个类似于拖尾现象怎么解释。

谢谢了。
5楼2010-05-13 21:43:35
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zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)

我觉得你的质粒当时有DNA的小片段污染,等你酶切的时候因为取的DNA量很小,所以再跑电泳就看不出来了(被稀释了),至于那个小小的轻微的条带俺认为或许是胶的问题
将有能量帮助他人作为自己的人生追求!
6楼2010-05-13 23:58:11
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lyg7720349

铜虫 (小有名气)

感觉是蛋白污染~~
望大家都各有所获!
7楼2010-05-14 00:29:47
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杨玉5352

木虫 (小有名气)

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引用回帖:
Originally posted by zcqcau at 2010-05-13 23:58:11:
我觉得你的质粒当时有DNA的小片段污染,等你酶切的时候因为取的DNA量很小,所以再跑电泳就看不出来了(被稀释了),至于那个小小的轻微的条带俺认为或许是胶的问题

我前面说过“酶切中DNA浓度是质粒浓度的三分之一”。我感觉如果是你说的被稀释了,那酶切完后也应该有淡淡的一片拖尾吧,不可能什么都没有。

谢谢您的回复
8楼2010-05-14 08:15:30
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liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
质粒构型很多,超螺旋,线性,单链等等,都有,还有,小的DNA或大的基因组污染,总之,你酶切后的很好,没有问题,继续你的实验吧~
9楼2010-05-14 09:19:18
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zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个就不清楚 了
引用回帖:
Originally posted by 杨玉5352 at 2010-05-14 08:15:30:



我前面说过“酶切中DNA浓度是质粒浓度的三分之一”。我感觉如果是你说的被稀释了,那酶切完后也应该有淡淡的一片拖尾吧,不可能什么都没有。

谢谢您的回复

将有能量帮助他人作为自己的人生追求!
10楼2010-05-14 17:00:13
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