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寒蕤

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】大提质粒 已有6人参与

大提质粒之后测OD260/OD280为1.5,含有杂蛋白,那么对于后面的转染有较大的影响。此时的质粒如何处理才可以用于转染细胞。请教各位!谢谢!
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
过柱子进行纯化
2楼2010-06-25 08:28:15
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zemin_fang

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
重新酚氯仿抽提
3楼2010-06-25 09:02:31
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小周

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酚氯仿异戊醇抽提,PEG8000纯化
4楼2010-06-25 09:40:59
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ilxly

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
重新抽提好了,步骤严格些。
5楼2010-06-25 10:11:23
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liyong1981

金虫 (正式写手)


那得多大的组柱子啊,人都说是大量提的了,小柱子是小抽用的~
6楼2010-06-25 10:28:59
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寒蕤

铜虫 (小有名气)

大提质粒用于转染

我又重新用柱子纯化了一遍,比值到了1.63,还是没有1.8。这里我用的是Qiagen-tip-100的柱子,应该不是杂蛋白的问题,请教各位,有可能是什么原因呢?还有,当时我同时大提的空质粒与重组质粒,空质粒的比值是1.8,而重组质粒未达到。这个我有点疑问。谢谢各位!
7楼2010-06-25 17:55:36
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寒蕤

铜虫 (小有名气)

谢谢

引用回帖:
Originally posted by lixg at 2010-06-25 08:28:15:
过柱子进行纯化

谢谢!
8楼2010-06-25 18:03:01
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寒蕤

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zemin_fang at 2010-06-25 09:02:31:
重新酚氯仿抽提

酚氯仿抽提之后对转染细胞有影响吗?
9楼2010-06-25 18:04:08
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寒蕤

铜虫 (小有名气)

谢谢

引用回帖:
Originally posted by 小周 at 2010-06-25 09:40:59:
酚氯仿异戊醇抽提,PEG8000纯化

谢谢!
10楼2010-06-25 18:04:31
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