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kirby13

禁虫 (初入文坛)

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3楼2012-03-16 15:10:45

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whb21

木虫 (著名写手)

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西瓜: 金币+2, Good! 2012-03-18 17:32:53

关于那个菌，建议你先划线培养后再用LB液体培养。
质粒提取以前做都是用的试剂盒，方便并且质量也还过得去，你要是就为了做PCR测序的话，提取纯质粒可以，提取量大小不是很重要。

2楼2012-03-16 15:01:32

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

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最好是划板，筛选阳性单菌落。质粒提取小提盒子就行了。

4楼2012-03-16 19:29:06

steler_ly

铜虫 (正式写手)

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西瓜: 金币+1, 赞成！ 2012-03-18 17:33:19

关于甘油菌，建议划线后再摇……
质粒的话，碱裂解完全可以，你就放心的搞吧！

5楼2012-03-17 10:14:40

小白虾

木虫 (小有名气)

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西瓜: 金币+1, 鼓励 2012-03-18 17:33:32

假如载体是常见的话，可以直接给公司菌液，让他们提质粒然后测序，测序价格是一样的。若不是通用引物，可以自己提供引物。

飞的更高

6楼2012-03-17 22:16:30

kirby13

禁虫 (初入文坛)

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7楼2012-03-19 18:35:19

西瓜

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7楼: Originally posted by kirby13 at 2012-03-19 18:35:19:
谢谢你们的回答哈。我还有个问题，这个质粒>42kb,应该属于大质粒吧，若用碱法和普通小量提取小质粒的碱法相同么？

大于10kb就是大质粒了。如果是碱裂解法手提，没有太大的区别，如果用的是试剂盒，说明书上会有专门的说明。

8楼2012-03-19 20:09:11

kirby13

禁虫 (初入文坛)

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9楼2012-03-19 20:42:20

zcc3255

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熊猫

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引用回帖:

3楼: Originally posted by kirby13 at 2012-03-16 15:10:45:
谢谢你的回答哈，我想问下：我们那个菌之前已经活化过了，现在可以直接复苏使用么？

之前，是冰箱里吗？
从冰箱拿出来要划线重新活化过再用

10楼2012-03-19 22:55:35