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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于甘油菌复苏及提质粒两个问题求助
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kirby13

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2012-03-16 14:35:19
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kirby13

禁虫 (初入文坛)
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3楼2012-03-16 15:10:45
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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西瓜: 金币+2, Good! 2012-03-18 17:32:53
关于那个菌，建议你先划线培养后再用LB液体培养。
质粒提取以前做都是用的试剂盒，方便并且质量也还过得去，你要是就为了做PCR测序的话，提取纯质粒可以，提取量大小不是很重要。
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2楼2012-03-16 15:01:32
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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最好是划板，筛选阳性单菌落。质粒提取小提盒子就行了。
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4楼2012-03-16 19:29:06
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steler_ly

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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西瓜: 金币+1, 赞成！ 2012-03-18 17:33:19
关于甘油菌，建议划线后再摇……
质粒的话，碱裂解完全可以，你就放心的搞吧！
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5楼2012-03-17 10:14:40
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小白虾

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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西瓜: 金币+1, 鼓励 2012-03-18 17:33:32
假如载体是常见的话，可以直接给公司菌液，让他们提质粒然后测序，测序价格是一样的。若不是通用引物，可以自己提供引物。
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飞的更高
6楼2012-03-17 22:16:30
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kirby13

禁虫 (初入文坛)
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7楼2012-03-19 18:35:19
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kirby13 at 2012-03-19 18:35:19:
谢谢你们的回答哈。我还有个问题，这个质粒>42kb,应该属于大质粒吧，若用碱法和普通小量提取小质粒的碱法相同么？

大于10kb就是大质粒了。如果是碱裂解法手提，没有太大的区别，如果用的是试剂盒，说明书上会有专门的说明。
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8楼2012-03-19 20:09:11
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kirby13

禁虫 (初入文坛)
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9楼2012-03-19 20:42:20
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zcc3255

木虫 (正式写手)

熊猫

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引用回帖:
3楼: Originally posted by kirby13 at 2012-03-16 15:10:45:
谢谢你的回答哈，我想问下：我们那个菌之前已经活化过了，现在可以直接复苏使用么？

之前，是冰箱里吗？
从冰箱拿出来要划线重新活化过再用
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10楼2012-03-19 22:55:35
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