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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】甘油洗菌
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】甘油洗菌 已有7人参与

制作电转感受态时为什么用甘油洗菌呐？有什么原理吗？谢谢
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1楼 2010-07-06 10:10:37
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天外飞仙→顺

铜虫 (小有名气)
wwdxx2004(金币+1): 2010-07-06 21:18:57
起到保护菌的作用
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我无法改变自己的出生，但我可以决定自己的命运：命中注定我是一个王者，我必须拿出王者的风范！！！
2楼2010-07-06 10:23:29
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yangjunzju

木虫 (正式写手)
★
看天(金币+1):是的 甘油比热大 抗冷冻 也是蛋白的保护剂 2010-07-06 12:17:43
wwdxx2004(金币+1): 2010-07-06 21:18:53
wwdxx2004(金币+1): 2010-07-12 17:32:53
保护细菌的作用，感受态制作过程中有置于冰上的过程。。。用甘油洗过后可以防止冰晶形成而损伤细胞。。。
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3楼2010-07-06 12:15:52
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
wwdxx2004(金币+1): 2010-07-06 21:19:01
支持楼上滴。制备感受态和保菌的时候也可以不用甘油，DMSO的效果一样
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
4楼2010-07-06 12:35:26
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yangjunzju at 2010-07-06 12:15:52:
保护细菌的作用，感受态制作过程中有置于冰上的过程。。。用甘油洗过后可以防止冰晶形成而损伤细胞。。。

为什么要洗菌呐？与之后的电穿孔有什么关系吗？谢谢了
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5楼2010-07-06 21:20:03
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yangjunzju at 2010-07-06 12:15:52:
保护细菌的作用，感受态制作过程中有置于冰上的过程。。。用甘油洗过后可以防止冰晶形成而损伤细胞。。。

那也有用水洗菌制作感受态的啊 和甘油洗菌有什么不同吗 如果现做现用是不是用水更好呐 谢谢
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6楼2010-07-12 17:34:20
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-07-13 01:01:13
甘油可以，其实soc也行。主要是起到一个补充营养的作用，因为刚刚进行完转化，感受态细胞需要足够营养生存，以便使得质粒复制，另外也起到一个缓冲和保护的作用！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
7楼2010-07-12 19:31:08
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yangjunzju

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
wwdxx2004(金币+1): 2010-07-12 22:27:36
scelab(金币+3):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-07-13 01:01:33
引用回帖:
Originally posted by wwdxx2004 at 2010-07-12 17:34:20:

那也有用水洗菌制作感受态的啊 和甘油洗菌有什么不同吗 如果现做现用是不是用水更好呐 谢谢

洗菌的话主要是把一些培养基清洗掉，清洗过后有助于提高电转效率。当然我们平时用的Cacl2法制作感受态的过程也是利用Ca离子能改变细胞膜的通透性从而提高外源DNA的转化效率。单用水清洗细菌制备感受态我好像没有做过，不知道是否可以，但我想就算此种方法可以，这种单一用水清洗制备的感受态肯定活力没有用甘油清洗的活力高，自然转化效率也就要大打折扣。
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8楼2010-07-12 19:39:56
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yangjunzju at 2010-07-12 19:39:56:



洗菌的话主要是把一些培养基清洗掉，清洗过后有助于提高电转效率。当然我们平时用的Cacl2法制作感受态的过程也是利用Ca离子能改变细胞膜的通透性从而提高外源DNA的转化效率。单用水清洗细菌制备感受态我好像 ...

Cacl2不是用来制作化转感受态的吗？也能制作电转感受态吗？那不就有离子了吗？能进行电转吗？
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9楼2010-07-12 22:29:24
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2010-07-12 19:31:08:
甘油可以，其实soc也行。主要是起到一个补充营养的作用，因为刚刚进行完转化，感受态细胞需要足够营养生存，以便使得质粒复制，另外也起到一个缓冲和保护的作用！

soc应该是用来复苏的吧 洗菌不能用吧
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10楼2010-07-12 22:30:38
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