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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wwdxx2004

版主

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[交流] 【求助/交流】甘油洗菌 已有7人参与

制作电转感受态时为什么用甘油洗菌呐?有什么原理吗?谢谢
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天外飞仙→顺

版主

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wwdxx2004(金币+1): 2010-07-06 21:18:57
起到保护菌的作用
我无法改变自己的出生,但我可以决定自己的命运:命中注定我是一个王者,我必须拿出王者的风范!!!
2楼2010-07-06 10:23:29
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yangjunzju

兑换贵宾

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看天(金币+1):是的 甘油比热大 抗冷冻 也是蛋白的保护剂 2010-07-06 12:17:43
wwdxx2004(金币+1): 2010-07-06 21:18:53
wwdxx2004(金币+1): 2010-07-12 17:32:53
保护细菌的作用,感受态制作过程中有置于冰上的过程。。。用甘油洗过后可以防止冰晶形成而损伤细胞。。。
3楼2010-07-06 12:15:52
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zhaohq1209

超级版主

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wwdxx2004(金币+1): 2010-07-06 21:19:01
支持楼上滴。制备感受态和保菌的时候也可以不用甘油,DMSO的效果一样
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
4楼2010-07-06 12:35:26
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wwdxx2004

版主

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引用回帖:
Originally posted by yangjunzju at 2010-07-06 12:15:52:
保护细菌的作用,感受态制作过程中有置于冰上的过程。。。用甘油洗过后可以防止冰晶形成而损伤细胞。。。

为什么要洗菌呐?与之后的电穿孔有什么关系吗?谢谢了
5楼2010-07-06 21:20:03
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wwdxx2004

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
Originally posted by yangjunzju at 2010-07-06 12:15:52:
保护细菌的作用,感受态制作过程中有置于冰上的过程。。。用甘油洗过后可以防止冰晶形成而损伤细胞。。。

那也有用水洗菌制作感受态的啊 和甘油洗菌有什么不同吗 如果现做现用是不是用水更好呐 谢谢
6楼2010-07-12 17:34:20
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天使托

新虫

T.Shen

★ ★
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-07-13 01:01:13
甘油可以,其实soc也行。主要是起到一个补充营养的作用,因为刚刚进行完转化,感受态细胞需要足够营养生存,以便使得质粒复制,另外也起到一个缓冲和保护的作用!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
7楼2010-07-12 19:31:08
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yangjunzju

主管区长

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★ ★ ★
wwdxx2004(金币+1): 2010-07-12 22:27:36
scelab(金币+3):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-07-13 01:01:33
引用回帖:
Originally posted by wwdxx2004 at 2010-07-12 17:34:20:

那也有用水洗菌制作感受态的啊 和甘油洗菌有什么不同吗 如果现做现用是不是用水更好呐 谢谢

洗菌的话主要是把一些培养基清洗掉,清洗过后有助于提高电转效率。当然我们平时用的Cacl2法制作感受态的过程也是利用Ca离子能改变细胞膜的通透性从而提高外源DNA的转化效率。单用水清洗细菌制备感受态我好像没有做过,不知道是否可以,但我想就算此种方法可以,这种单一用水清洗制备的感受态肯定活力没有用甘油清洗的活力高,自然转化效率也就要大打折扣。
8楼2010-07-12 19:39:56
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wwdxx2004

专家顾问

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引用回帖:
Originally posted by yangjunzju at 2010-07-12 19:39:56:



洗菌的话主要是把一些培养基清洗掉,清洗过后有助于提高电转效率。当然我们平时用的Cacl2法制作感受态的过程也是利用Ca离子能改变细胞膜的通透性从而提高外源DNA的转化效率。单用水清洗细菌制备感受态我好像 ...

Cacl2不是用来制作化转感受态的吗?也能制作电转感受态吗?那不就有离子了吗?能进行电转吗?
9楼2010-07-12 22:29:24
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wwdxx2004

兑换贵宾

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引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2010-07-12 19:31:08:
甘油可以,其实soc也行。主要是起到一个补充营养的作用,因为刚刚进行完转化,感受态细胞需要足够营养生存,以便使得质粒复制,另外也起到一个缓冲和保护的作用!

soc应该是用来复苏的吧 洗菌不能用吧
10楼2010-07-12 22:30:38
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