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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】甘油洗菌
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】甘油洗菌 已有7人参与

制作电转感受态时为什么用甘油洗菌呐？有什么原理吗？谢谢
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1楼 2010-07-06 10:10:37
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)
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Originally posted by yangjunzju at 2010-07-06 12:15:52:
保护细菌的作用，感受态制作过程中有置于冰上的过程。。。用甘油洗过后可以防止冰晶形成而损伤细胞。。。

为什么要洗菌呐？与之后的电穿孔有什么关系吗？谢谢了
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5楼2010-07-06 21:20:03
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金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yangjunzju at 2010-07-06 12:15:52:
保护细菌的作用，感受态制作过程中有置于冰上的过程。。。用甘油洗过后可以防止冰晶形成而损伤细胞。。。

那也有用水洗菌制作感受态的啊 和甘油洗菌有什么不同吗 如果现做现用是不是用水更好呐 谢谢
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6楼2010-07-12 17:34:20
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yangjunzju at 2010-07-12 19:39:56:



洗菌的话主要是把一些培养基清洗掉，清洗过后有助于提高电转效率。当然我们平时用的Cacl2法制作感受态的过程也是利用Ca离子能改变细胞膜的通透性从而提高外源DNA的转化效率。单用水清洗细菌制备感受态我好像 ...

Cacl2不是用来制作化转感受态的吗？也能制作电转感受态吗？那不就有离子了吗？能进行电转吗？
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9楼2010-07-12 22:29:24
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)
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Originally posted by 天使托 at 2010-07-12 19:31:08:
甘油可以，其实soc也行。主要是起到一个补充营养的作用，因为刚刚进行完转化，感受态细胞需要足够营养生存，以便使得质粒复制，另外也起到一个缓冲和保护的作用！

soc应该是用来复苏的吧 洗菌不能用吧
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10楼2010-07-12 22:30:38
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wwdxx2004

金虫 (正式写手)
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Originally posted by yangjunzju at 2010-07-13 08:44:53:

是的啊，我没说是用来电转的啊。。

哦 呵呵 我是做电转的呵呵
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12楼2010-07-14 10:16:01
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