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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】-20度保存大肠杆菌菌株，加多少甘油合适？
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tingspdf

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】-20度保存大肠杆菌菌株，加多少甘油合适？

如题，由于实验室没有-80冰箱，转化后的E.coli该加多少甘油保存在-20度？30%还是50%？希望最少保半年后还能再次活化。
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1楼 2011-03-30 22:21:58
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~~ 2011-03-30 23:07:52
tingspdf(金币+4): 2011-03-30 23:59:04
还要看你转化的什么质粒，如果是pet系列的，甘油浓度不要超过10%。15-30%足够了，你见过50%甘油的限制性内切酶结冰么。
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2楼2011-03-30 22:49:24
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tingspdf

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-30 22:49:24:
还要看你转化的什么质粒，如果是pet系列的，甘油浓度不要超过10%。15-30%足够了，你见过50%甘油的限制性内切酶结冰么。

takara的pMD18-T载体
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3楼2011-03-30 23:25:29
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紫琳

金虫 (著名写手)
tingspdf(金币+3): 2011-03-30 23:59:11
10%～15%即可

我冻的甘油管15%放2年 照样能摇出来 Pet的质粒 DH5a
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4楼2011-03-30 23:34:09
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cxfans

铁杆木虫 (著名写手)
tingspdf(金币+3): 2011-03-30 23:59:15
我实验室 保存菌株和细菌用的都是15%的甘油
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5楼2011-03-30 23:39:18
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by tingspdf at 2011-03-30 23:25:29:
takara的pMD18-T载体

15-30% 就可以，呵呵。
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6楼2011-03-30 23:39:34
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tingspdf

至尊木虫 (著名写手)
谢谢楼上各位!
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7楼2011-03-30 23:59:29
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
甘油并不是越多越好，会发生突变
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8楼2011-03-31 06:15:13
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