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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 小提质粒
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wcx蜗牛

无虫 (小有名气)

[交流] 小提质粒 已有11人参与

最近用北京索莱宝公司的小提质粒盒，可提出质粒时好时环。请问有哪位用过的，说说用此试剂盒应注意的事项……
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1楼 2011-12-10 16:34:47
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wangsongwei

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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西瓜(金币+3): 鼓励应助！加了溶液3后还是需要轻柔的呀，可以多颠倒几次达到混匀的效果。 2011-12-13 18:37:56
提质粒的关键有以下几点：首先，菌液培养时间，一般12-16个小时（3-5ml的培养体积）就足够了，不要培养过长的时间。其次，加完溶液I重悬一定要彻底，这是溶液II高效裂解的前提。其他的包括：加完溶液II后要裂解时动作要轻柔，而加了溶液III后则要相对剧烈，保证充分混匀（中和）。当然，好的试剂盒其试剂和吸附膜的质量比较稳定，也是一个很重要的因素。
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10楼2011-12-12 10:30:14
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普通回帖

rollandyoung

金虫 (小有名气)
★
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用过天根的，感觉还行
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2楼2011-12-10 18:20:13
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shaquila

金虫 (正式写手)
★ ★
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西瓜(金币+1): 有道理~ 2011-12-11 17:58:24
这真没啥好说的，加入蓉液二后动作要轻，如果是量不多，也许是裂解液失效了
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3楼2011-12-10 18:34:43
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panda73

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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西瓜(金币+3): Good！再加上3楼说的就差不多了。另外试剂盒的说明书里也会有常见问题的解决方法，可以看看。 2011-12-11 17:59:43
提质粒的关键有以下几点：首先，菌液培养时间，一般12-16个小时（3-5ml的培养体积）就足够了，不要培养过长的时间。其次，加完溶液I重悬一定要彻底，这是溶液II高效裂解的前提。其他的包括：加完溶液II后要裂解时动作要轻柔，而加了溶液III后则要相对剧烈，保证充分混匀（中和）。当然，好的试剂盒其试剂和吸附膜的质量比较稳定，也是一个很重要的因素。
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wcx蜗牛
4楼2011-12-10 22:51:04
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allmessup

铜虫 (初入文坛)
★ ★
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西瓜(金币+1): 同意~ 2011-12-11 17:58:47
引用回帖:
4楼: Originally posted by panda73 at 2011-12-10 22:51:04:
提质粒的关键有以下几点：首先，菌液培养时间，一般12-16个小时（3-5ml的培养体积）就足够了，不要培养过长的时间。其次，加完溶液I重悬一定要彻底，这是溶液II高效裂解的前提。其他的包括：加完溶液II后要裂解时 ...

加完II和III都不应当太剧烈吧，否则都会导致基因组DNA的污染、虽然III可以稍微剧烈一点
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Ipsascientiapotestasest.
5楼2011-12-11 00:08:48
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txy8469393

木虫 (小有名气)

拿着扫把的研究僧
★
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提个质粒用啥试剂盒啊，直接配好溶液123，酚氯仿抽，醇沉淀。提质粒没事，随便咋混，最后都是一堆堆的。基因组要轻柔点干活
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找我请打110,你别看我拿着扫把,其实我是弹吉他的!
6楼2011-12-11 08:20:27
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dls1987

铁杆木虫 (正式写手)
★
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提质粒可以算是最粗犷的实验了，只要注意加入溶液2和3后不要剧烈振荡就行。
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7楼2011-12-11 10:54:58
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辉辉集团

银虫 (正式写手)
★
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技术算是比较简单的 不知道是否你经验不够
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8楼2011-12-11 14:08:45
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yangzhouqi

铁虫 (著名写手)
★
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一直用康为世纪的试剂盒，发现最后洗质粒时30vl的水最后得到的质粒几乎有一半，这柱子吸水太多了，
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格物致知
9楼2011-12-11 15:41:42
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