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【求助/交流】大提质粒
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寒蕤
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专业: 微生物生理与生物化学
[交流]
【求助/交流】大提质粒
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大提质粒之后测OD260/OD280为1.5,含有杂蛋白,那么对于后面的转染有较大的影响。此时的质粒如何处理才可以用于转染细胞。请教各位!谢谢!
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1楼
2010-06-24 23:06:13
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liyong1981
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虫号: 357405
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专业: antibody
那得多大的组柱子啊,人都说是大量提的了,小柱子是小抽用的~
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6楼
2010-06-25 10:28:59
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小周
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专业: 抗体工程学
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
酚氯仿异戊醇抽提,PEG8000纯化
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4楼
2010-06-25 09:40:59
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ilxly
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专业: 金属有机化学
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
重新抽提好了,步骤严格些。
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5楼
2010-06-25 10:11:23
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寒蕤
铜虫
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虫号: 1008517
注册: 2010-04-29
专业: 微生物生理与生物化学
大提质粒用于转染
我又重新用柱子纯化了一遍,比值到了1.63,还是没有1.8。这里我用的是Qiagen-tip-100的柱子,应该不是杂蛋白的问题,请教各位,有可能是什么原因呢?还有,当时我同时大提的空质粒与重组质粒,空质粒的比值是1.8,而重组质粒未达到。这个我有点疑问。谢谢各位!
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7楼
2010-06-25 17:55:36
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