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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提质粒时如何去除RNAase
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buky

铁虫 (小有名气)

[求助] 提质粒时如何去除RNAase

用碱裂解法手工提取质粒，没有用试剂盒。提取质粒后，加入RNAase在37度降解RNA之后，如何去除RNAase 和降解后的核苷酸呢？谢谢！
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1楼 2011-05-11 11:08:03
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-05-11 12:40:54
buky(金币+3): 2011-05-11 17:45:41
buky(金币+3): 2011-05-12 15:47:05
你可以在溶液1中加入RNAse，后续步骤不变，即可
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2楼2011-05-11 12:14:33
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
顶柯南君，就是这样！
提质粒后面的抽提步骤会把RNAse去掉，而这之前RNAse已经能把RNA干掉了。
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3楼2011-05-11 13:45:01
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20号马努

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

buky(金币+1): 2011-05-11 17:46:40
洗涤的时候，都多洗一遍
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4楼2011-05-11 13:53:03
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sfb1020

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
buky(金币+2): 2011-05-11 17:46:33
西瓜(金币+3): 也可以的 2011-05-12 09:28:33
酚氯仿异戊醇抽提，去除RNase，再乙醇沉淀
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5楼2011-05-11 15:07:58
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
buky(金币+1): 2011-05-11 17:46:18
西瓜(金币+3): 鼓励交流。不过Inhibitor只能抑制，去掉抑制剂后还是有活力的。 2011-05-12 09:28:18
大部分蛋白抑制剂可以用于哺乳动物核糖核酸酶的失活，像RiboLock™ RNase Inhibitor，或者SDS、2‘尿苷什么的应该也可以让他失活，也可以通过spin column或酚/氯仿抽提进行去除
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6楼2011-05-11 16:18:44
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