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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】中提质粒的时候需要加RNA酶吗？
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wlihust

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】中提质粒的时候需要加RNA酶吗？

我提取的质粒没有加RNA酶，跑胶的结果是有一条很亮很亮的带，有点不正常，请问是不是有RNA的原因？
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1楼 2010-12-27 12:54:44
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
wlihust(金币+1):谢谢 2010-12-27 13:33:25
那条很亮很亮的带就是RNA，加不加没有什么关系，不会影响到后续的操作。
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2楼2010-12-27 13:04:25
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feng__

金虫 (著名写手)
wlihust(金币+1):谢谢 2010-12-27 13:33:32
一般是要加的，不用很多，但是如果条带不是很小，和RNA分不开的话，应该也没问题的····
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3楼2010-12-27 13:05:26
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srlee

铁杆木虫 (小有名气)
wlihust(金币+2):谢谢 2010-12-27 13:33:15
如果没有加RNA酶，电泳时条带约靠前即为RNA，这很正常的啊。看你后续实验做什么用的，如果就是检验一下质粒大小或做PCR没有什么太大影响；若做其他的实验建议加点RNA酶，再抽提一下就好了！
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4楼2010-12-27 13:05:58
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wlihust

铜虫 (小有名气)
我提质粒之后要做双酶切的，因为目的片度很小，那条很亮很亮的带把我的目的片段都遮住了，我想应该是要加RNA酶的，那么在过夜双酶切之后再往管子里加少量的RNA酶然后37℃水浴半个小时，不知道效果会不会好点？
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5楼2010-12-27 13:16:00
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
wlihust(金币+2):谢谢 2010-12-27 13:32:59
引用回帖:
Originally posted by wlihust at 2010-12-27 13:16:00:
我提质粒之后要做双酶切的，因为目的片度很小，那条很亮很亮的带把我的目的片段都遮住了，我想应该是要加RNA酶的，那么在过夜双酶切之后再往管子里加少量的RNA酶然后37℃水浴半个小时，不知道效果会不会好点？

提完质粒之后，用枪尖沾一点儿浓贮RNase，在管子里面搅一搅就OK了。RNase无处不在，后续的实验中RNA降解的就差不多了。
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6楼2010-12-27 13:19:59
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well_想太多

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-27 13:19:59
提完质粒之后，用枪尖沾一点儿浓贮RNase，在管子里面搅一搅就OK了。RNase无处不在，后续的实验中RNA降解的就差不多了。...

前辈你好,我是提完质粒后加入20微升的TE(其中不含Rnaase),像你说的是用枪尖沾点在TE中搅拌一下吗?然后还需要37℃水浴半个小时吗?
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7楼2015-01-29 20:59:30
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