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阿娇

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[交流] 【求助/交流】提质粒后有RNA污染，可以加点RNA酶处理吗？已有3人参与

如题。会不会影响测序？急！

[ Last edited by 阿娇 on 2010-9-19 at 11:30 ]

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1楼 2010-09-19 11:26:04

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zhandeguo1

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RNA

阿娇(金币+3):谢谢！加RNA酶会影响测序吗？ 2010-09-19 13:46:30

最好不要。可以用酒精或异丙醇沉淀纯化质粒。

2楼2010-09-19 11:56:36

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linysm

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阿娇(金币+3):谢谢！ 2010-09-19 15:58:51

测序也需要酶的，很有可能影响，所以坚决不要！宁可不处理也不要加其他东西，纯化吧。

3楼2010-09-19 14:34:26

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silicare

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阿娇(金币+3):谢谢！ 2010-09-19 15:59:08

消化之后需要酚氯仿抽提

4楼2010-09-19 15:20:22

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墨香若水

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阿娇(金币+1):谢谢参与 2010-09-20 13:18:29

提质粒本来就有一个环节加RNA酶。

仕不可不弘毅，任重而道远

5楼2010-09-19 16:19:43

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yanliusu

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阿娇(金币+1):谢谢 2010-09-20 13:19:25

可以的，没什么影响

6楼2010-09-19 16:38:16

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gene001

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阿娇(金币+1):谢谢 2010-09-20 13:19:34

可以加RNA酶，要测序用的话，可以做一步纯化（乙醇沉淀等方法）！

大家共同交流、共同提高！！！

7楼2010-09-19 18:55:00

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zhandeguo1

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引用回帖:

Originally posted by zhandeguo1 at 2010-09-19 11:56:36:
最好不要。可以用酒精或异丙醇沉淀纯化质粒。

添加新的东西肯定不好。最好不要。异丙醇沉淀可以对RNA的影响有一定的去处效果。

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8楼2010-09-22 22:43:18

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zjzz

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如果加酶处理的话，之后可以用苯酚纯化去蛋白

或者用LiCl处理去RNA

以后抽提质粒可以在SolutionI 或III里加RNA酶处理

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终于熬成木虫了……

9楼2010-09-23 03:11:27

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linxi8579

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提取时溶液一里就加了啊，后面有纯化。你不是用试剂盒吗

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10楼2010-09-23 10:38:09

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