| 查看: 1852 | 回复: 11 | |||
dongfangzz银虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助/交流】关于RNA提取后DNaseⅠ的处理已有8人参与
|
|
三个问题： 1、要做Real-time PCR。总RNA提取后，RNA中DNaseⅠ的处理是常规的步骤还是可做可不做？ 2、用苯酚/氯仿抽提法去除DNaseⅠ时，有资料说 加入10μl 3M的醋酸钠，250μl 冷乙醇，冰上放置10分钟。该步的冷乙醇是无水乙醇还是70％的乙醇。后面的步骤用的是70％的乙醇（标明的）。而该处没标明浓度，很迷惑！ 3、问题2中的 10μl 3M的醋酸钠 ，其中的3M 是什么意思？是浓度吗？但是浓度也不是这么表示的呀？ 谢谢 [ Last edited by dongfangzz on 2010-6-4 at 12:20 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
二苄基磷酰氯，磷酸接酚羟基，
已经有11人回复
-
二苄基磷酰氯，磷酰氯
已经有10人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有54人回复
-
酸酐或者羧酸酰氯化
已经有15人回复
-
酚羟基接入磷酸，磷酸酯化
已经有26人回复
-
土壤中可溶性有机碳种类
已经有1人回复
-
韩国海关检测食用植物油中的苯并芘用的是哪种方法？
已经有0人回复
-
现有pP43NMK质粒，想换了pHT43，或者其他芽孢杆菌过表达质粒
已经有5人回复
-
请教脂质体包裹miRNA
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 昆虫触角总RNA提取疑问
已经有12人回复
- DNase I 处理RNA样品问题
已经有12人回复
- 细菌RNA提取后跑电泳出现一条暗带和在泳道中弥散都是什么原因？
已经有9人回复
- 请问血清RNA怎样提取？又怎样验证已提取出血清RNA？
已经有19人回复
- 关于RNA提取的方法
已经有6人回复
- 关于RNA提取的问题
已经有8人回复
- RNA用DNase 处理后的问题
已经有3人回复
- 提取RNA时，为何会有DNA条带，并且有且只有一条带？
已经有9人回复
- 【求助/交流】烟曲霉菌提取RNA
已经有11人回复
- 【求助/交流】提RNA后用DNase消化后PCR仍有目的条带，该如何避免呢？
已经有13人回复
- 【求助/交流】关于提取RNA所用枪头的处理问题
已经有26人回复
- 【求助/交流】处理RNA中的DNase时所用的DETA或醋酸钠怎么配？
已经有3人回复
- 【求助/交流】RNA提取中所用液体怎么处理才能灭活RNAase
已经有8人回复
- 【求助/交流】DNase 处理 RNA 的具体步骤（不用试剂盒）
已经有12人回复
- 分子生物学课程教学讲义 朱玉贤
已经有26人回复
ben1147
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 18 (小学生)
- 贵宾: 0.003
- 金币: 5847.6
- 红花: 6
- 帖子: 952
- 在线: 116.9小时
- 虫号: 709538
- 注册: 2009-02-26
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2010-06-04 12:57:25
3楼2010-06-04 16:08:19
lixg
铁杆木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 7627.1
- 散金: 1
- 红花: 7
- 帖子: 591
- 在线: 106.4小时
- 虫号: 859417
- 注册: 2009-09-29
- 专业: 发育生物学
4楼2010-06-04 17:12:58
yangym1123
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1963.2
- 帖子: 230
- 在线: 30.2小时
- 虫号: 397777
- 注册: 2007-06-10
- 专业: 动物形态学及胚胎学
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):good 2010-06-04 21:35:13
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):good 2010-06-04 21:35:13
| 一般是需要处理RNA中的基因组DNA的，即使电泳看不到DNA的污染，09年的一篇文章给出了荧光定量PCR发SCI论文的要求：MIQE，Google学术搜一下第一篇即是，处理基因组DNA是为了避免基因组污染的一个环节，还有跨内含子设计引物，试剂RTminus的对照；可是使用试剂盒提取RNA（在这个过程除去RNA中的DNA，如Qiagen和天跟的盒子）也可以用Fermentas的DNase I 在反转录之前处理基因组DNA，处理完用EDTA失活后接着往下做反转录就可以（我们实验室以前都是这么做的），关于MIQE的这篇文章建议做荧光定量发SCI的看看！祝你好运！ |
5楼2010-06-04 21:23:54
dongfangzz
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 531.6
- 散金: 16
- 红花: 5
- 帖子: 206
- 在线: 83.4小时
- 虫号: 890108
- 注册: 2009-11-01
- 性别: GG
- 专业: 医学
6楼2010-06-04 21:42:48
ben1147
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 18 (小学生)
- 贵宾: 0.003
- 金币: 5847.6
- 红花: 6
- 帖子: 952
- 在线: 116.9小时
- 虫号: 709538
- 注册: 2009-02-26
- 专业: 微生物生理与生物化学
7楼2010-06-04 21:59:53
8楼2010-06-08 17:11:48
dongfangzz
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 531.6
- 散金: 16
- 红花: 5
- 帖子: 206
- 在线: 83.4小时
- 虫号: 890108
- 注册: 2009-11-01
- 性别: GG
- 专业: 医学
9楼2010-06-09 23:11:06
ben1147
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 18 (小学生)
- 贵宾: 0.003
- 金币: 5847.6
- 红花: 6
- 帖子: 952
- 在线: 116.9小时
- 虫号: 709538
- 注册: 2009-02-26
- 专业: 微生物生理与生物化学
10楼2010-06-09 23:14:52
5