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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取的质粒 RNA含量高 如何去除
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liugangpk545

铜虫 (小有名气)

[求助] 提取的质粒 RNA含量高 如何去除

我提取完质粒后   电泳鉴定    发现有很多RNA    测下OD  260/280比值大于2

我想求助下   如何除去样品里的RNA
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有一种缘，放手后成为风景。
1楼 2012-01-05 11:46:38
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longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liugangpk545(金币+2): ★★★很有帮助 谢谢帮助 2012-01-05 12:51:14
小丹木木(金币+2): 鼓励积极应助哦 2012-01-05 15:55:11
加RNase A 消化去除RNA。可以先加1 ul或2ul，37度水浴1-2小时（如果RNA实在太多，仍可消化过夜），然后取一点电泳看看RNA是否已去除。
作为要求严格的实验在消化后最好再进行氯仿抽提一下去除RNase，视你后续实验而定。
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伟大航线....
2楼2012-01-05 12:47:04
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imyting

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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wanhscn(金币+2): 鼓励分享经验！ 2012-01-06 01:08:13
liugangpk545(金币+2): ★有帮助 谢谢回帖 2012-01-06 12:39:18
自己手提的是吧？最好一次提取用的菌液少点，这样消化起来也更快更干净。RNase A一般浓度达到100ug/ml就可以了。另外，RNase A容易失活，最好能确定其是否失效。
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悠哉游哉做实验，成兮败兮我随便
3楼2012-01-05 17:29:32
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btx362237729

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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wanhscn(金币+1): 有道理！ 2012-01-06 01:08:28
liugangpk545(金币+2): ★★★很有帮助 谢谢回帖 2012-01-06 12:39:50
不需要管 过几天就没了。。。RNA太容易降解，要快就加RNase吧
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人生最黑暗的时光终于过去了
4楼2012-01-05 23:53:36
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heroyl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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liugangpk545(金币+1): ★有帮助 谢谢回帖 2012-01-06 12:40:21
最好溶解的时候用加有RNAse的水溶解就好了。
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实验虐我千百遍，我待实验如初恋
5楼2012-01-06 09:07:26
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hxwhu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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liugangpk545(金币+1): 谢谢回帖 2012-01-06 12:40:51
用试剂盒吧，方便也便宜，从没发现RNA的污染，生工的才几毛钱一个样
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6楼2012-01-06 10:48:35
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huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试剂盒中一般都会带有RNA酶，一般加到P1里面就能解决问题，楼主不会现在还用手提把？
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7楼2012-01-07 09:18:57
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coolsc

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-01-08 21:18:24
RNase是处理的有效方法，注意保证试剂活性，添加量100ug/ml。实验遇到过顽固的RNA，自行降解很缓慢。如果实在难去除，建议考虑过夜处理。
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8楼2012-01-07 10:51:28
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jialiang310

木虫 (小有名气)
方法都差不多，就像上面的高手说的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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9楼2012-01-08 05:05:27
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rtt0325

银虫 (小有名气)
★
小丹木木(金币+1): 鼓励积极应助 2012-01-10 20:10:38
我们把RNase配成10mg的母液，然后每毫升TE里面就加2ul的RNase，就用TE溶质粒，RNA就没有了，RNase很稳定的
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10楼2012-01-10 20:00:31
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