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liugangpk545

铜虫 (小有名气)

[求助] 提取的质粒 RNA含量高 如何去除

我提取完质粒后   电泳鉴定    发现有很多RNA    测下OD  260/280比值大于2

我想求助下   如何除去样品里的RNA
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有一种缘,放手后成为风景。
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longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liugangpk545(金币+2): ★★★很有帮助 谢谢帮助 2012-01-05 12:51:14
小丹木木(金币+2): 鼓励积极应助哦 2012-01-05 15:55:11
加RNase A 消化去除RNA。可以先加1 ul或2ul,37度水浴1-2小时(如果RNA实在太多,仍可消化过夜),然后取一点电泳看看RNA是否已去除。
作为要求严格的实验在消化后最好再进行氯仿抽提一下去除RNase,视你后续实验而定。
伟大航线....
2楼2012-01-05 12:47:04
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imyting

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(金币+2): 鼓励分享经验! 2012-01-06 01:08:13
liugangpk545(金币+2): 有帮助 谢谢回帖 2012-01-06 12:39:18
自己手提的是吧?最好一次提取用的菌液少点,这样消化起来也更快更干净。RNase A一般浓度达到100ug/ml就可以了。另外,RNase A容易失活,最好能确定其是否失效。
悠哉游哉做实验,成兮败兮我随便
3楼2012-01-05 17:29:32
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btx362237729

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(金币+1): 有道理! 2012-01-06 01:08:28
liugangpk545(金币+2): ★★★很有帮助 谢谢回帖 2012-01-06 12:39:50
不需要管 过几天就没了。。。RNA太容易降解,要快就加RNase吧
人生最黑暗的时光终于过去了
4楼2012-01-05 23:53:36
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heroyl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
liugangpk545(金币+1): 有帮助 谢谢回帖 2012-01-06 12:40:21
最好溶解的时候用加有RNAse的水溶解就好了。
实验虐我千百遍,我待实验如初恋
5楼2012-01-06 09:07:26
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hxwhu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
liugangpk545(金币+1): 谢谢回帖 2012-01-06 12:40:51
用试剂盒吧,方便也便宜,从没发现RNA的污染,生工的才几毛钱一个样
6楼2012-01-06 10:48:35
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huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
试剂盒中一般都会带有RNA酶,一般加到P1里面就能解决问题,楼主不会现在还用手提把?
7楼2012-01-07 09:18:57
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coolsc

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-01-08 21:18:24
RNase是处理的有效方法,注意保证试剂活性,添加量100ug/ml。实验遇到过顽固的RNA,自行降解很缓慢。如果实在难去除,建议考虑过夜处理。
8楼2012-01-07 10:51:28
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jialiang310

木虫 (小有名气)

方法都差不多,就像上面的高手说的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2012-01-08 05:05:27
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rtt0325

银虫 (小有名气)


小丹木木(金币+1): 鼓励积极应助 2012-01-10 20:10:38
我们把RNase配成10mg的母液,然后每毫升TE里面就加2ul的RNase,就用TE溶质粒,RNA就没有了,RNase很稳定的
10楼2012-01-10 20:00:31
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