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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 为什么荧光定量后还要跑电泳呢
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ann花开花落

铜虫 (正式写手)

[求助] 为什么荧光定量后还要跑电泳呢 已有1人参与

为什么荧光定量PCR溶解曲线确定是单峰后还要电泳进行确定是否有引物二聚体呢？这个怎么看呢，请虫子们帮我解答下
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1楼 2011-08-30 14:50:41
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-04 09:47:22
跑电泳大概是为了确定你的引物是不是能批出你要的基因吧，这个就是产物大小是不是你要求的基因而已。。。
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6楼2011-09-04 09:04:08
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love04love07

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 欢迎新虫交流 2011-09-04 18:50:19
我本科毕业设计做的就是QRT-PCR，对PCR产物跑电泳，以确定他的bp数和引物设计的大小完全一致，没有错误。貌似有无引物二聚体是从溶解温度的单一来判断的。
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7楼2011-09-04 15:29:17
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cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-05 07:47:01
谁告诉你荧光定量后腰跑电泳啊？一般是荧光定量前跑电泳，看看引物，产物情况。
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9楼2011-09-05 03:20:02
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普通回帖

melinda_ldj5383

铜虫 (初入文坛)
我做荧光定量PCR没有进行电泳啊。不太懂这方面的。
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不努力的人生就是犯罪。
2楼2011-08-30 14:57:15
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love_st

金虫 (著名写手)
★
西瓜(金币+1): 一般不出问题的话都不跑胶了 2011-08-30 18:36:28
在跑电泳个人感觉就本末倒置了，realtime的灵敏度比电泳的高太多，二聚体这东西电泳时候都不一定能看的出来
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3楼2011-08-30 15:01:54
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zenghong1528

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-09-02 06:59:03
没必要跑电泳，只要你的溶解曲线够好就行，峰越高且单一是最好的
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4楼2011-09-01 20:39:21
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475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-09-02 06:59:13
本人感觉没有必要跑电泳了，应该先在引物设计好的时候，在做荧光定量之前跑电泳的，没听说过做过定量再跑PCR电泳的，不和常理 啊，荧光定量可是比电泳灵敏10倍哦
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
5楼2011-09-01 21:45:32
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quiller2000

木虫 (著名写手)
楼主还是详细解释一下为什么要跑电泳吧，额们还第一次听说呢！搞不清楚啊
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致良知
8楼2011-09-05 00:33:05
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感觉跑电泳这一步是多余的
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
10楼2011-09-05 09:58:40
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