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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教盐酸胍助溶冻干蛋白干粉时，羟胺裂解后 ，跑电泳问题！！！！
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njunkai

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教盐酸胍助溶冻干蛋白干粉时，羟胺裂解后 ，跑电泳问题！！！！

近来做羟胺裂解，由于其冻干的蛋白干粉通过溶解液溶解时不完全，故加入盐酸胍助溶，裂解效率比较高，但是电泳时发现用SDS上样缓冲液处理样本，出现沉淀现象，煮沸后又可以溶解这沉淀，只是加到电泳槽后又形成沉淀了，跑电泳会比其他没有盐酸胍的电泳槽出跑得慢，一开始以为跑不下来，在80V跑后慢慢你又与其他的条带跑齐了。。。。真是纠结，不知道这样改怎么处理比较好，还在跑电泳，不知道结果怎么样就是了，不知道会不会影响？？？？各位大侠帮忙出出主意呢。谢谢哈！！！！
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1楼2011-08-27 11:45:39
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njunkai

新虫 (初入文坛)
自己沙发，网各位同仁大虾们帮帮忙的呢。。。有劳了啊
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2楼2011-08-27 11:46:11
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xhjggl

木虫 (正式写手)
★
adslye(金币+1): 感谢交流~祝顺利！ 2011-08-28 13:59:46
SDS与盐酸胍反应，产生不溶性的沉淀
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3楼2011-08-27 19:03:29
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njunkai

新虫 (初入文坛)
那这该怎么处理好呢，一方面是想通过加入盐酸胍提高羟胺裂解的效率，但这就是会影响电泳结果啊！！！
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4楼2011-08-28 11:00:17
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云霆子

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
adslye(金币+3): 鼓励新虫虫应助~~常来哈~~ 2011-08-28 18:16:41
这个很简单，将样品煮沸后趁热上样，能够点入胶孔就可以，然后直接电泳，虽然的确会跑得很丑，但至少能够分辨。我们实验室用盐酸胍溶解包涵体然后电泳就是用的这样的方法。
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5楼2011-08-28 15:29:37
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njunkai

新虫 (初入文坛)
哦，这我现在也用这种方法呢，就是跑出来的条带结果不好。。。。但我又要进行结果的分析呢！！！尴尬了！！！！！
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6楼2011-08-29 09:37:00
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