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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教高手 电泳为什么是蛋白质小分子跑在最下面
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tangshiqing

金虫 (小有名气)

[交流] 请教高手 电泳为什么是蛋白质小分子跑在最下面 已有7人参与

在跑电泳时候，用SDS把蛋白质电荷中和掉之后，蛋白质到底是以什么个顺序跑啊。
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路自己走，梦自己园！
1楼 2011-05-12 14:14:03
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★ ★ ★ ★
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西瓜(金币+5, EPI+1): 学习了！ 2011-05-12 19:17:47
SDS可以与蛋白质结合，使得蛋白质带上比自己氨基酸残基侧链多得多的电荷，使得每个蛋白质的电荷密度与原本等电点和分子量无关。而且SDS与蛋白质的结合物构型都是短棒型，只是随分子量大小而变长。聚丙烯酰胺凝胶内部有很多大小不一的孔径，小分子的短棒容易通过，大分子的棒受到小孔径的阻挡，只能通过大孔径才能顺利通过，所以最终小分子短棒速度快，大分子长棒速度慢。

需要注意的是，这确实是分子筛效应，但是这个的所有孔径都在凝胶上，凝胶处于夹板之间没有空隙，不存在没有凝胶的空间，长棒不能通过没有孔径的空隙穿过。这和Sephadex凝胶过滤分离蛋白质不一样，Sephadex凝胶是球状，存在外水体积，洗脱液不带电，蛋白质依靠分子量来分离，小分子蛋白质能穿过众多小孔径和大孔径所以速度最慢，大分子蛋白质不能穿过小孔径只能穿过大孔径和无孔径的外水体积所以出来最快。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-05-12 19:04:40
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): good 2011-05-12 18:58:19
按照分子大小，小的在前，大的在后。
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2楼2011-05-12 14:21:46
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+3): good 2011-05-12 18:58:29
中和掉电荷后，凝胶的作用就类似于分子筛，以及你分离胶浓度的不同，分离蛋白大小的能力就不同，在电泳时，蛋白分子量小的跑的要快，离点样孔远，分子量大的则跑得慢，里点样孔近
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3楼2011-05-12 14:28:15
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shaohuiwu007

新虫 (小有名气)
同样上述观点
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知识属于整个人类，大家一起分享，共同促进人类的发展。
5楼2011-05-17 16:24:20
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sph150

金虫 (小有名气)
说明很到位
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一心朝着自己的目标奋斗的人，全世界都会给他让路。————黑格尔
6楼2012-01-09 20:19:20
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jixiaoman12

新虫 (初入文坛)
★
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蛋白质是带电荷大分子能进行分子凝胶，分子量小的蛋白质能通过凝胶孔径，大分子量的不能通过孔径，且电泳凝胶没有凝胶间隙，所以大分子跑得慢，小分子跑得快
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7楼2014-08-23 10:40:22
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jixiaoman12

新虫 (初入文坛)
★
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4楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-12 19:04:40
SDS可以与蛋白质结合，使得蛋白质带上比自己氨基酸残基侧链多得多的电荷，使得每个蛋白质的电荷密度与原本等电点和分子量无关。而且SDS与蛋白质的结合物构型都是短棒型，只是随分子量大小而变长。聚丙烯酰胺凝胶内部 ...

你好 想向您请教一下有关蛋白质分子量的问题。我看到有文献说蛋白质中7S的分子量在180000-210000Da之间，11S分子量在302000-375000Da，从两一篇文献中（蛋白酶水解大豆分离蛋白的分子水平表征）看到凝胶电泳图显示7S的分子量大小大于11S，我有点糊涂了，两者到底哪个分子量大，希望大侠不吝赐教
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8楼2014-08-23 10:44:11
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
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8楼: Originally posted by jixiaoman12 at 2014-08-23 10:44:11
你好 想向您请教一下有关蛋白质分子量的问题。我看到有文献说蛋白质中7S的分子量在180000-210000Da之间，11S分子量在302000-375000Da，从两一篇文献中（蛋白酶水解大豆分离蛋白的分子水平表征）看到凝胶电泳图显示 ...

7S？我接触到的是KD为单位的多，不了解S，不好意思。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2014-08-23 21:47:42
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tangshiqing

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by jixiaoman12 at 2014-08-23 10:44:11
你好 想向您请教一下有关蛋白质分子量的问题。我看到有文献说蛋白质中7S的分子量在180000-210000Da之间，11S分子量在302000-375000Da，从两一篇文献中（蛋白酶水解大豆分离蛋白的分子水平表征）看到凝胶电泳图显示 ...

s应该是指的沉降系数。
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路自己走，梦自己园！
10楼2017-08-22 15:21:04
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