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chy200920

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】请问各位高手 毛细管电泳的电渗流如何测定啊?已有6人参与

如何如测电渗流
我是新手上路,做的事毛细管电泳分离蛋白,现在需要测定电渗流
请问各位高手   如何测定电渗流啊?具体怎么操作啊?
我用的DMSO检测无信号 不出峰  正负电压都不出峰
电渗流具体需要测定哪些数据来计算啊?

好像需要这些参数:ueo为电渗流速度,εo和εr分别为真空介电常数和相对介电常数,E为电场强度,ξ为Zeta电势,η为流动相粘度。ΛD为双电层的电荷密度,δ为双电层
可是 相对介电常数εr,η为流动相粘度与ΛD为双电层的电荷密度都怎么得到啊?


谢谢大家帮忙啊   不胜感激!!!!
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maimai77

新虫 (初入文坛)

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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-09-10 15:16:55
有一篇文章,1996年的,比较早了,就是说的电渗流测定,Fast, Accurate Mobility Determination Method for Capillary Electrophoresis。楼主可以参考下。
2楼2010-09-07 17:52:34
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jiayoua

金虫 (小有名气)

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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-09-10 15:17:01
用中性标记物就可以测电渗流了吧,DMSO测不到吗?我之前用254波长都能检测到得啊,检测端为负极,你可以加大DMSO浓度试试。。。
知道不知道~~~
3楼2010-09-07 18:37:50
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xiaochun85

银虫 (小有名气)

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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-09-10 15:17:05
测定电渗流最经典的方法由Jorgenson和Lukacs所报道[11]的,可以选择在所用缓冲条件下为中性的组分作为中性标记物(例如硫脲),测定其迁移时间,按公式(1-2)计算出电渗率。
    (1-2)
公式(1-2)中, 和 分别嗲表毛细管的有效长度和总长度, 表示施加在毛细管两端的电压,而 表示的中性标记物的迁移时间。
4楼2010-09-07 21:00:38
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xiaochun85

银虫 (小有名气)

内容已删除
5楼2010-09-07 21:02:02
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chy200920

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by maimai77 at 2010-09-07 17:52:34:
有一篇文章,1996年的,比较早了,就是说的电渗流测定,Fast, Accurate Mobility Determination Method for Capillary Electrophoresis。楼主可以参考下。

谢谢哈  可是我查不到这篇文献啊
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6楼2010-09-08 15:56:34
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chy200920

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by jiayoua at 2010-09-07 18:37:50:
用中性标记物就可以测电渗流了吧,DMSO测不到吗?我之前用254波长都能检测到得啊,检测端为负极,你可以加大DMSO浓度试试。。。

谢谢啦  呵呵
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7楼2010-09-08 15:56:59
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chy200920

新虫 (初入文坛)

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8楼2010-09-08 15:57:35
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通

★ ★ ★ ★
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happy169(金币+3):thanks! 2010-09-10 15:17:40
楼主既然是做蛋白质的,首先要考虑你用的是什么样的管子,如果是裸管,用DMSO,硫脲或丙酮都可以作为电渗标记物来测定电渗流。但是如果楼主如果使用的是涂层管,尤其是消除电渗流的非极性涂层管,那么由于该管子的电渗流非常小,所以电中性的电渗标记物难以出峰。
我记得有篇专门讨论小电渗流的毛细管电渗流测定的,但是由于我也有两年没再关注相关文献,所以记不清了,总体来说,这篇文献是采用电泳一段时间,然后用压力将电渗标记物吹出毛细管,由此进行计算的。
七窍通了六窍
9楼2010-09-08 16:25:27
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zhsy1007

新虫 (初入文坛)


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用中性化合物进样,用出峰时间、所加的电压、毛细管总长、进样端到检测窗口的有效长度,用这几个参数,再查色谱书电渗流计算公式计算
10楼2014-12-04 21:59:15
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