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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】提质粒后跑的电泳图
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杨玉5352

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】提质粒后跑的电泳图 已有6人参与



             用TAKARA试剂盒提得质粒，大小倒是差不多，就不不知道为什么那后面的拖尾是怎么回事，希望大家给分析分析，谢谢了。
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1楼 2010-05-13 16:37:00
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飞侠8683

新虫 (小有名气)

提取时DNA发生断裂

★
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应该是提取时有DNA发生断裂
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2楼2010-05-13 16:41:02
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
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基因组的污染，～一般不会影响，你最好跑个酶切。质粒不酶切，我从来没听过能判断大小～
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3楼2010-05-13 16:46:05
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cqyniu

金虫 (小有名气)
★
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应该是有DNA的污染，找一个酶进行一下单酶切，再进行电泳，才能确定质粒的条带大小的，不然不准确的。
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4楼2010-05-13 21:07:50
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杨玉5352

木虫 (小有名气)

提质粒后跑的电泳图 和酶切图



以上是我最新的酶切后电泳图，不知到为什么，酶切后的条带干干净净的就一条条带。酶切中DNA浓度是质粒浓度的三分之一。



请大家给分析一下质粒后面那个类似于拖尾现象怎么解释。

谢谢了。
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5楼2010-05-13 21:43:35
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zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)
我觉得你的质粒当时有DNA的小片段污染，等你酶切的时候因为取的DNA量很小，所以再跑电泳就看不出来了（被稀释了），至于那个小小的轻微的条带俺认为或许是胶的问题
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6楼2010-05-13 23:58:11
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lyg7720349

铜虫 (小有名气)
感觉是蛋白污染~~
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望大家都各有所获！
7楼2010-05-14 00:29:47
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杨玉5352

木虫 (小有名气)

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引用回帖:
Originally posted by zcqcau at 2010-05-13 23:58:11:
我觉得你的质粒当时有DNA的小片段污染，等你酶切的时候因为取的DNA量很小，所以再跑电泳就看不出来了（被稀释了），至于那个小小的轻微的条带俺认为或许是胶的问题

我前面说过“酶切中DNA浓度是质粒浓度的三分之一”。我感觉如果是你说的被稀释了，那酶切完后也应该有淡淡的一片拖尾吧，不可能什么都没有。

谢谢您的回复
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8楼2010-05-14 08:15:30
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
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质粒构型很多，超螺旋，线性，单链等等，都有，还有，小的DNA或大的基因组污染，总之，你酶切后的很好，没有问题，继续你的实验吧～
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9楼2010-05-14 09:19:18
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zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个就不清楚 了
引用回帖:
Originally posted by 杨玉5352 at 2010-05-14 08:15:30:



我前面说过“酶切中DNA浓度是质粒浓度的三分之一”。我感觉如果是你说的被稀释了，那酶切完后也应该有淡淡的一片拖尾吧，不可能什么都没有。

谢谢您的回复

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10楼2010-05-14 17:00:13
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