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[交流]
碱裂解法提质粒之怪现象
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| 如题，最近一直在做克隆，质粒提取经常出现同样的问题：同样的实验操作，之前有提取出来，最近几次都是失败，电泳检测无条带出现，其中有时会有RNase消化后浑浊，离心有不溶物的现象。用了鼎国质粒快速提取试剂盒提取，同样无结果，师姐说是不是实验室摇床出问题了... 虫友们帮忙支支招，谢谢啦~ |
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2楼2011-09-26 18:01:36
3楼2011-09-26 18:23:58
4楼2011-09-26 18:47:41
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10楼2011-09-28 14:26:02
11楼2011-09-30 15:34:14
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A.花点时间设计阴阳性对照排除各种可能，比如： 1.找一个实验室别人的菌，肯定有质粒的。用现有试剂提一遍。排除：试剂和手法问题。 2.如果1中提出来了，说明是菌的问题。 2.1还有没有保种的菌？有的话，拿来摇起来，提一下。 2.2用别的保种的菌做阳性对照，与自己的菌一起摇，排除培养问题。 等等，做一个系统的规划，就不会乱了。 B.提质粒出问题，好久没见过了。没必要为这种实验浪费时间。 有个快捷方法：请隔壁实验室的MM吃顿饭，让她用她的试剂帮你提一遍。 如果提不出，基本确定是菌的问题了，估计还是很严重的问题。 祝好运，十一快乐。 |
12楼2011-09-30 17:04:51
13楼2011-09-30 18:53:08
14楼2011-09-30 18:58:19
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| 我们用TAKARA或OMEGA试剂盒，屡试不爽。一般就是提取液的问题，建议试剂盒提取。 |
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tianhuijuan15楼2011-10-03 19:21:07
16楼2011-10-03 21:36:43
17楼2014-08-21 13:04:13
