| 查看: 2561 | 回复: 10 | ||
[求助]
大提质粒遇到的问题
|
最近刚开始做分子生物学，大提质粒，做了几次，用的是天根的大提试剂盒，目录号：DP117，收率有些低，而且每次OD260/OD280nm 都是2.2，这个值太不正常了，可能是什么原因？哪步造成的呢？希望大家帮忙分析分析。上传的图，左边三道是我分别提的质粒的电泳图，另边是Marker。谢谢大家。 1.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有193人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助：重组质粒酶切问题！请大家帮我解决一下，急！
已经有7人回复
- 质粒转染成功后质粒小提出现了问题
已经有4人回复
- 提不出质粒，不知道出了什么问题，求助……
已经有17人回复
- 求助啊！转质粒出现问题了！
已经有13人回复
- 酵母质粒转化及提取验证问题求助
已经有12人回复
- 质粒片段丢失问题
已经有3人回复
- 线性化及完整的质粒电泳问题。
已经有23人回复
- 【求助/交流】质粒提取的杂质去除问题
已经有14人回复
gwd0312
木虫 (正式写手)
“无冕之王”
- MolEPI: 5
- 应助: 131 (高中生)
- 金币: 1973.2
- 红花: 10
- 帖子: 418
- 在线: 88.3小时
- 虫号: 1067565
- 注册: 2010-08-01
- 性别: GG
- 专业: 质谱分析
2楼2012-09-05 10:21:22
3楼2012-09-05 11:36:03
4楼2012-09-05 13:05:20
5楼2012-09-05 13:21:04
6楼2012-09-05 14:19:34
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gaga123: 金币+2, ★有帮助 2012-09-06 15:31:35
感谢参与，应助指数 +1
gaga123: 金币+2, ★有帮助 2012-09-06 15:31:35
|
本帖内容被屏蔽 |
7楼2012-09-05 15:06:57
huguangdong
至尊木虫 (职业作家)
- MolEPI: 2
- 应助: 68 (初中生)
- 金币: 10532.4
- 散金: 858
- 红花: 102
- 帖子: 4271
- 在线: 1581.2小时
- 虫号: 1009663
- 注册: 2010-05-01
- 专业: 畜牧学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-09-06 13:38:17
gaga123: 金币+6, ★★★很有帮助 2012-09-06 15:31:13
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-09-06 13:38:17
gaga123: 金币+6, ★★★很有帮助 2012-09-06 15:31:13
| OD值太高考虑是否为细菌本身RNA或者基因组污染，提取过程中注意P1溶液悬浮细菌要充分，P2碱裂解菌体时间不宜过长，不要超过3分钟，另外这中间不管是我选混匀还是上下颠倒混匀的时候动作要小要轻柔，防止宿主本身基因组和RNA污染质粒，OD值过高一般是这方面的原因，但我个人经验，一般只要按照说明书操作都没有问题，而且实际操作过程中比值在1.7-2.1之间都视为合格，理想状态是1.8-2.0，如果楼主再试一次还是这种情况，建议换盒子，国产的大提质粒盒子质量上普遍有缺陷，建议使用omega或者promega的。 |
8楼2012-09-05 15:16:59
9楼2012-09-06 14:46:39
gongeleven
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 55 (初中生)
- 金币: 7107.8
- 散金: 222
- 红花: 3
- 帖子: 432
- 在线: 152.9小时
- 虫号: 1082982
- 注册: 2010-08-27
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
10楼2012-09-06 16:16:46
