应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大提质粒遇到的问题
111/2返回列表12下一页
查看: 2523  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

gaga123

木虫 (小有名气)

[求助] 大提质粒遇到的问题

最近刚开始做分子生物学，大提质粒，做了几次，用的是天根的大提试剂盒，目录号：DP117，收率有些低，而且每次OD260/OD280nm 都是2.2，这个值太不正常了，可能是什么原因？哪步造成的呢？希望大家帮忙分析分析。上传的图，左边三道是我分别提的质粒的电泳图，另边是Marker。谢谢大家。

1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-05 09:48:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的这个maker是多大的，你提取的质粒大概多大啊？
赞一下 回复此楼
持之以恒、永不放弃！
2楼2012-09-05 10:21:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

monson2008

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要是提的量比较大就不要浪费了，可以把提好的质粒再纯化一遍试试。
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-05 11:36:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaga123

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by monson2008 at 2012-09-05 11:36:03
要是提的量比较大就不要浪费了，可以把提好的质粒再纯化一遍试试。

我现在是想让大家帮忙分析一下原因， 260/280太高了，我大提质粒几次都这样。。。自己也不知道是哪块出问题了。。。谢谢大家。
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-05 13:05:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junminh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gaga123: 金币+2, ★有帮助 2012-09-06 15:31:29
跑的时间有点长，个人感觉：前面有条带，即可能有RNA污染；其二，有拖尾现象，即存在DNA少许降解或者蛋白等其它杂质污染的问题。
赞一下 回复此楼
5楼2012-09-05 13:21:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaga123

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by junminh at 2012-09-05 13:21:04
跑的时间有点长，个人感觉：前面有条带，即可能有RNA污染；其二，有拖尾现象，即存在DNA少许降解或者蛋白等其它杂质污染的问题。

那应该在哪几个步骤中需要注意呢？谢谢。
赞一下 回复此楼
6楼2012-09-05 14:19:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skmlz87

禁虫 (初入文坛)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gaga123: 金币+2, ★有帮助 2012-09-06 15:31:35
本帖内容被屏蔽
7楼2012-09-05 15:06:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-09-06 13:38:17
gaga123: 金币+6, ★★★很有帮助 2012-09-06 15:31:13
OD值太高考虑是否为细菌本身RNA或者基因组污染，提取过程中注意P1溶液悬浮细菌要充分，P2碱裂解菌体时间不宜过长，不要超过3分钟，另外这中间不管是我选混匀还是上下颠倒混匀的时候动作要小要轻柔，防止宿主本身基因组和RNA污染质粒，OD值过高一般是这方面的原因，但我个人经验，一般只要按照说明书操作都没有问题，而且实际操作过程中比值在1.7-2.1之间都视为合格，理想状态是1.8-2.0，如果楼主再试一次还是这种情况，建议换盒子，国产的大提质粒盒子质量上普遍有缺陷，建议使用omega或者promega的。
赞一下 回复此楼
8楼2012-09-05 15:16:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junminh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

说明书仔细看下，然后参考下分子生物学实验指南，其实这个问题是个常见问题，并不是很复杂
赞一下 回复此楼
9楼2012-09-06 14:46:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
果断Qiagen或者Invitrogen
赞一下 回复此楼
10楼2012-09-06 16:16:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 gaga123 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历 +12 曦熙兮 2026-03-15 12/600 2026-03-19 19:42 by maocaozhuxi
[考研] 288求调剂 +14 于海海海海 2026-03-19 14/700 2026-03-19 19:40 by maocaozhuxi
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +3 葵梓卫队 2026-03-18 5/250 2026-03-19 19:35 by 给你你注意休息
[考研] 一志愿北京化工大学0703化学318分，有科研经历，求调剂 +3 一瓶苯甲酸 2026-03-14 3/150 2026-03-19 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-18 3/150 2026-03-19 14:42 by peike
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +7 小材化本科 2026-03-18 7/350 2026-03-19 10:46 by Linda Hu
[考研] 274求调剂 +6 S.H1 2026-03-18 6/300 2026-03-19 09:34 by 花店相见
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +3 xbxudjdn 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:14 by zhq0425
[考研] 085600材料与化工 +5 安全上岸！ 2026-03-16 5/250 2026-03-18 15:33 by cmz0325
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +8 Ncdx123456 2026-03-13 9/450 2026-03-18 14:40 by haxia
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 0703化学求调剂 总分331 +3 ZY-05 2026-03-13 3/150 2026-03-18 10:58 by macy2011
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考研] 考研化学学硕调剂，一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] ［0860］321分求调剂，ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭