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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 质粒片段丢失问题
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lv34257740

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒片段丢失问题

各位虫友，我想请教一下你们有没有遇到过质粒片段丢失的问题啊？
我现在的实验要用到一个自杀性质粒，之前验证正确后将携带该质粒的宿主菌保种，现在我重新复苏菌株提取质粒，发现质粒片段丢失了，大小减少了一千多个bp，但抗性还是有的，即便是能提到跟之前大小一样的质粒，电泳会发现在正确的质粒条带下面也会有一条较小的条带，大小也是减少了1000多，查文献也没有找到相关的介绍，实在是不知道到底是为什么。
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1楼 2011-05-11 20:44:58
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare(金币+3, EPI+1): 谢谢参与 2011-05-12 12:04:42
确实可能会出现这种情况，我自己也碰到过，同时也碰到过质粒中多了一段序列的情况。原因可能是：1、质粒的部分序列可能与宿主的基因组发生了重组；2、该质粒可以在宿主菌中表达，对宿主产生negative的作用，宿主的自我保守机制对质粒进行了修改。我觉得可以的话可以换一个诱导型的启动子，需要表达的时候进行诱导，此时即使质粒被修改，需要表达的也都已经表达，应该就影响不大了。当质粒不表达的时候，质粒应该是不会不修改的。
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2楼2011-05-11 21:48:44
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lv34257740

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2011-05-11 21:48:44:
确实可能会出现这种情况，我自己也碰到过，同时也碰到过质粒中多了一段序列的情况。原因可能是：1、质粒的部分序列可能与宿主的基因组发生了重组；2、该质粒可以在宿主菌中表达，对宿主产生negative的作用，宿主的 ...

这个质粒是别的实验室赠送的，不知道这样直接往下做还有没有效果呢，会不会性质也会改变啊？
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3楼2011-05-12 15:41:46
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

lv34257740(金币+2): 2011-05-14 16:43:21
引用回帖:
Originally posted by lv34257740 at 2011-05-12 15:41:46:
这个质粒是别的实验室赠送的，不知道这样直接往下做还有没有效果呢，会不会性质也会改变啊？

这个质粒已经变了的话肯定是不能继续做的。我已经将这个质粒转到像如JM109中保菌，提取出来的话应该问题不大的，然后再转目的菌。
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4楼2011-05-12 19:18:44
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