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黎亚丽

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】什么会造成质粒的丢失?已有21人参与

我现在在做连接转化,为什么转化后提不出质粒来呢?难道是质粒丢失了?我想知道大家有没有关于质粒丢失这方面的书或者网站什么的?
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
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看天(金币+1):谢谢交流 2010-07-07 18:05:03
转化后应先做菌落PCR,再摇菌提质粒。如果你已做菌落PCR且呈阳性,但提不出质粒,那就是假阳性。不存在质粒丢失的问题。
6楼2010-07-07 17:58:06
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普通回帖

lstt09nk

铁杆木虫 (职业作家)

小堂

★ ★
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看天(金币+1):鼓励交流 2010-07-07 18:04:48
不是质粒丢失,是根本就没转进去啊~~
你再回头看看你的操作有没有问题吧
或者是连接酶连接好~
坚持能无数次改变人生的风景,因为只要路是对的,就不怕远~~~
2楼2010-07-07 17:08:15
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旋木晴晴

金虫 (小有名气)

妞妞



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你没验证是否转进去就提质粒:dnd:
3楼2010-07-07 17:26:01
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tuobaohua

荣誉版主 (文坛精英)

投资理财发言人

优秀版主


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极大可能是质粒根本就没有转接进去
4楼2010-07-07 17:45:45
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zemin_fang

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
质粒没有转进去导致的假阳性
5楼2010-07-07 17:48:11
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wywangying169

银虫 (小有名气)


空载了!
好好自学,好好工作
7楼2010-07-08 11:16:00
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主


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杂菌 or  recA+重组
8楼2010-07-08 11:20:46
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
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看天(金币+1):鼓励交流 2010-07-08 13:22:36
转化涂板后PCR鉴定结果为阳性,建议将阳性克隆重新划平板,然后pcr鉴定,可减少假阳性几率。因为第一次的板子上会有很多未转进去的质粒,导致敏感的PCR反应阳性。
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
9楼2010-07-08 13:02:46
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violet.zhou

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
连接成功后有转化子长出,挑几个单菌落做PCR快检看是否连接成功,然后再摇菌提质粒。
10楼2010-07-08 13:31:58
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