【求助/交流】什么会造成质粒的丢失？ - 分子生物 - 综合其他

violet.zhou

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Originally posted by 黎亚丽 at 2010-07-09 15:20:03:

那你能告诉我PET-28a的质粒说明书是怎么写抗生素的问题的？

这个你自己到购买质粒的公司网站上下载不就行了

32楼2010-07-11 12:00:26

yangjunzju

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有可能是没有转进质粒，也有可能是质粒提取方法出错了，有质粒你没提出来。。。可以先用菌落PCR鉴定下看，然后重新提一次质粒看看。。。

33楼2010-07-11 16:58:46

ymzfeng

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看天(金币+1):鼓励交流 2010-07-12 07:28:21

没听说过这个
可能是没转化成功
先菌落PCR检测
在提质粒检测
再质粒PCR和酶切检测

34楼2010-07-11 23:35:14

段家一凡

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看天(金币+1):谢谢分享 2010-07-12 07:28:07

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Originally posted by bitdeng at 2010-07-10 20:51:37:
应该是空载了，从回帖中受益了！

看错了吧，不可能空载，前面已回答了，空载也是能提出智力的，只是没有连上。
平板能长，液体不能长，有时会碰到。你在转化一次看看，多培养几次。

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35楼2010-07-12 01:36:54

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Originally posted by 黎亚丽 at 2010-07-08 14:52:41:

连接后做的转化，在含有抗性的平板上长出菌落了，这不是初步证明转进去了吗？而且我做了菌落PCR也扩增出来了。

1.菌落PCR不能说明实质问题，有时候做菌落PCR的时候会将培养基上的残留模板加入反应导致假阳性。2.抗性平板中加入的抗生素有没有失效？

36楼2010-07-12 07:33:43

黎亚丽

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Originally posted by luckywen at 2010-07-10 21:23:52:
质粒没有转进去，试试提高浓度，也许会有帮助~~~

好的。谢谢!

37楼2010-07-12 09:54:50

黎亚丽

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Originally posted by yangjunzju at 2010-07-11 16:58:46:
有可能是没有转进质粒，也有可能是质粒提取方法出错了，有质粒你没提出来。。。可以先用菌落PCR鉴定下看，然后重新提一次质粒看看。。。

en好的，我试试吧！

38楼2010-07-12 09:56:14

黎亚丽

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Originally posted by violet.zhou at 2010-07-11 12:00:26:

这个你自己到购买质粒的公司网站上下载不就行了

找到了，谢谢！

39楼2010-07-12 09:56:51

黎亚丽

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Originally posted by 段家一凡 at 2010-07-12 01:36:54:

看错了吧，不可能空载，前面已回答了，空载也是能提出智力的，只是没有连上。
平板能长，液体不能长，有时会碰到。你在转化一次看看，多培养几次。

好吧！我觉得有必要重新转一次试试，

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40楼2010-07-12 09:58:02