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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】检测都目的片段，但提不出质粒！
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fcopm

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】检测都目的片段，但提不出质粒！ 已有5人参与

请教：
     我用1301构建载体，做菌液PCR可以得到目的片段，可是用试剂盒提质粒，提不出。请问是什么原因！请指教，谢谢！
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1楼 2010-10-22 18:04:30
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fjt198719

木虫 (著名写手)

永远的菜鸟
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-10-22 18:36:50
首先PCR这种东西很不准确的，证明转没转成功，还是要抽质粒酶切验证的，转化子质粒快检验证后，可以迅速挑选阳性克隆子，另外抽质粒本人觉得手提就很好了
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独YY不如众YY！！！
2楼2010-10-22 18:24:44
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foryever

木虫 (文坛精英)

假装忧伤的枯木桩
酶切是必需的，最好不要省
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　　　　　　　　　♨物是人非事事休，欲语泪先流♨
3楼2010-10-22 18:45:40
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fcopm

新虫 (初入文坛)
现在是质粒提不出来！一起的其他的载体都能提出来！
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4楼2010-10-23 18:16:32
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zj20101989

木虫 (小有名气)

孤雪飞萍
★ ★
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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-25 08:28:54
若是菌落PCR之后接着提，提不出，可能是试剂盒有问题，或者操作过程中，有很不当的地方（一般性的操作不当，跑胶后应当也会有条带，只不过不是一条或三条）；若是长时间之后才提的，有可能是质粒丢失。
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随缘随性，不争不胜。
5楼2010-10-23 19:37:01
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dzm317

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我有几次也是这个样子  应该是长的杂菌 不是要的质粒
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6楼2010-10-24 20:01:14
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