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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 转化时，长出白色单菌落，菌落ＰＣＲ后有条带，在培养，提质粒，没有条带，怎么回事
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韩元富豪

金虫 (小有名气)

[求助] 转化时，长出白色单菌落，菌落ＰＣＲ后有条带，在培养，提质粒，没有条带，怎么回事 已有3人参与

转化时，长出白色单菌落，菌落ＰＣＲ后有条带，在培养，提质粒，没有条带，怎么回事
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1楼 2014-06-15 18:33:38
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zhoumin-09

木虫 (小有名气)

铁杆木虫

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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-06-16 09:58:22
韩元富豪: 金币+2, ★有帮助 2014-06-25 20:32:46
应该两种可能:目的前段与宿主菌是否有同源性，还有就是质粒是否抽提出，可以酶切观察下

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谨言慎行
2楼2014-06-15 22:16:35
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zhoumin-09

木虫 (小有名气)

铁杆木虫

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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-06-16 09:58:26
韩元富豪: 金币+1, ★有帮助 2014-06-25 20:33:02
你还的考虑你这个质粒本生特性，是否是低拷贝质粒

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谨言慎行
3楼2014-06-15 22:17:36
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Renjingyu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-06-16 09:58:30
韩元富豪: 金币+2, ★有帮助 2014-06-25 20:33:13
操作的问题吧？我一般会挑5个做菌p，以免最后出错，提取的质粒最好酶切一下再电泳!

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即将加入研究生的大军，迷茫！
4楼2014-06-15 22:19:48
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

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gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-06-16 12:40:02
韩元富豪: 金币+2, ★有帮助 2014-06-25 20:33:22
活化的时候加抗生素了吗，不加抗生素质粒很容易丢失。如果是低拷贝质粒，要加大菌量再提，菌量太小也可能提不出来。
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5楼2014-06-16 10:39:06
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