应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】菌落PCR求助
241/3返回列表123下一页
查看: 2123  |  回复: 23
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Biohydrogen

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】菌落PCR求助已有9人参与

我做菌落PCR，为什么跑电泳的时候DNA只在点样井口呢？量较大，按理说不应该是基因组，哪位知道这是这么回事？多谢了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2010-10-02 13:55:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhwei1987

铁杆木虫 (正式写手)
Biohydrogen(金币+1): 2010-10-02 19:35:46
我有过这种情况，是因为胶没做好...
赞一下 回复此楼
2楼2010-10-02 15:43:49
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ddychenhua

新虫 (小有名气)
Biohydrogen(金币+1): 2010-10-02 19:35:49
你用的是菌落加入PCR体系还是摇菌后用的菌液？如果是菌落直接加的，有可能是你把培养基挑到体系里了，影响了电泳。建议先摇菌再PCR~好运~
赞一下 回复此楼
相信自己的信念
3楼2010-10-02 16:55:36
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Biohydrogen

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by Biohydrogen at 2010-10-02 13:55:40:
我做菌落PCR，为什么跑电泳的时候DNA只在点样井口呢？量较大，按理说不应该是基因组，哪位知道这是这么回事？多谢了！

但是marker跑得很好啊
赞一下 回复此楼
4楼2010-10-02 19:51:30
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ddychenhua

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by Biohydrogen at 2010-10-02 19:51:30:

但是marker跑得很好啊

因为marker没有加菌落呀，呵呵~我说的有可能是培养基污染了体系，marker不存在这个问题。
赞一下 回复此楼
相信自己的信念
5楼2010-10-02 21:48:34
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ddychenhua

新虫 (小有名气)
Biohydrogen(金币+1): 2010-10-05 15:04:37
引用回帖:
Originally posted by Biohydrogen at 2010-10-02 19:51:30:

但是marker跑得很好啊

我以前有过这样的问题，就是直接菌落长出来后，直接挑到PCR管中进行PCR，挑的比较用力把培养基带到体系里了，所以电泳的时候受到影响，和你说的结果有点像。我不知道你是不是也是这个问题。后来我就先把菌从培养皿里挑出来先摇菌，用菌液进行PCR，这样跑的电泳就比较好了。我不知道你的情况和我的是不是一样
赞一下 回复此楼
相信自己的信念
6楼2010-10-02 21:52:14
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

怎么都行

银虫 (小有名气)
Biohydrogen(金币+1): 2010-10-05 15:04:42
会不会是你菌体挑的太多了，大量的蛋白裂解产物妨碍了核酸的泳动？
赞一下 回复此楼
7楼2010-10-02 23:49:01
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凡龙

金虫 (著名写手)
Biohydrogen(金币+1): 2010-10-05 15:04:49
引用回帖:
Originally posted by ddychenhua at 2010-10-02 16:55:36:
你用的是菌落加入PCR体系还是摇菌后用的菌液？如果是菌落直接加的，有可能是你把培养基挑到体系里了，影响了电泳。建议先摇菌再PCR~好运~

有的时候是要靠运气，有时就是没有原因，再细致的重新做一次吧
赞一下 回复此楼
8楼2010-10-02 23:54:25
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ddychenhua

新虫 (小有名气)
Biohydrogen(金币+1): 2010-10-05 15:04:56
引用回帖:
Originally posted by 凡龙 at 2010-10-02 23:54:25:

有的时候是要靠运气，有时就是没有原因，再细致的重新做一次吧

Maybe~
回复此楼
相信自己的信念
9楼2010-10-03 00:12:45
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我本兽医

铁虫 (初入文坛)
Biohydrogen(金币+1): 2010-10-05 15:05:08
建议不要直接做菌液或者菌落PCR，假阳性的几率很大，还是提了质粒再进行后续试验吧，不会耽误多少时间的
赞一下 回复此楼
10楼2010-10-04 23:06:37
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Biohydrogen 的主题更新
241/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭