应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于菌落PCR
131/2返回列表12下一页
查看: 1296  |  回复: 12
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

weiminhb

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于菌落PCR已有11人参与

前几天做了一次菌落PCR，菌里有质粒，我是想验证质粒有没有转进去，结果没有扩增出目标条带，以质粒为模板进行对照，有目标条带。这是什么原因呢？这个质粒是低拷贝的，望高人指点。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2010-07-29 15:47:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louli

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-07-29 19:35:42
你的描述有点模糊
你的意思是：挑单菌落要的菌液直接PCR没有带是吗？如果这样的话可能是假阳性！
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-07-29 17:28:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiminhb

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by louli at 2010-07-29 17:28:56:
你的描述有点模糊
你的意思是：挑单菌落要的菌液直接PCR没有带是吗？如果这样的话可能是假阳性！

我是直接从斜面上挑菌做的菌落PCR，没有扩增出目标条带。而以质粒为模板，扩增出了目标条带
赞一下 回复此楼
3楼2010-07-29 18:08:49
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongyanna

金虫 (正式写手)
学习学习啊，呵呵呵
赞一下 回复此楼
自己的路，自己快乐的走
4楼2010-07-29 19:16:23
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

noheartman

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-29 19:35:54
菌落PCR如果没有扩增出目的片段，那就是重组质粒没有转进去
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-07-29 19:20:49
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
转染失败的可能性比较大
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-07-29 20:12:58
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huofuman

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能是没有转进去，多挑几个菌落做看看
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-07-29 20:56:58
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louli

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-30 08:19:06
引用回帖:
Originally posted by weiminhb at 2010-07-29 18:08:49:




   我是直接从斜面上挑菌做的菌落PCR，没有扩增出目标条带。而以质粒为模板，扩增出了目标条带

你是说提完质粒之后PCR有带是吗？但是我觉得菌液PCR的性质跟质粒PCR一样。你提完质粒之后跑胶了吗？有带吗？我做的时候出现了质粒没带，质粒PCR有带。这可能是因为PCR特性太强了！
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2010-07-30 07:47:38
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoru2010

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by weiminhb at 2010-07-29 15:47:14:
前几天做了一次菌落PCR，菌里有质粒，我是想验证质粒有没有转进去，结果没有扩增出目标条带，以质粒为模板进行对照，有目标条带。这是什么原因呢？这个质粒是低拷贝的，望高人指点。

你的片段多大？连接了多久？应该是没连接上，我之前也遇到过，后来1000以上的片段都连接24小时才可以的
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-07-30 08:44:54
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
挑菌落，提质粒，酶切验证~这是最有说服力的~PCR不具备说服力，
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-07-30 11:58:32
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 weiminhb 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 联培博士文章第一单位署名问题交流~ +4 橙成成c 2024-06-23 8/400 2024-06-23 23:43 by 风云无泪
[教师之家] 高校辞职，要求赔偿，这到底合不合理 +14 传动_海神 2024-06-23 19/950 2024-06-23 23:23 by dogdog2021
[基金申请] 国自然青年基金，1A4B能上会吗？青年和面上的上会标准是一样的吗？ +19 今晚推荐22 2024-06-20 32/1600 2024-06-23 23:17 by andywei1028
[基金申请] 江苏省333人才工程 出校后被刷的概率大不大？ +8 maxbirdzhang 2024-06-19 12/600 2024-06-23 20:39 by 查拉图斯特拉
[考博] 一名额难求啊 +11 pinbo拼搏 2024-06-19 11/550 2024-06-23 19:44 by shadowout
[有机交流] 生成亚胺的反应怎么能进行完全 +3 1369836 2024-06-23 3/150 2024-06-23 18:44 by hwqMSE
[基金申请] 请问三个字的中文名字，在文中到底怎么表示？ 5+3 zhongyuan764 2024-06-22 6/300 2024-06-23 17:42 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 国产期刊影响因子大于12的有20多个个了 +17 babu2015 2024-06-20 22/1100 2024-06-23 13:12 by 德尚中行
[有机交流] 求助 10+7 脂质纳米粒 2024-06-20 9/450 2024-06-23 07:52 by buhui7829
[公派出国] CSC博士联培对将来就业有用吗 +3 也就这样 2024-06-22 3/150 2024-06-22 22:04 by 326lhpqk
[基金申请] 江南大学到瑞士招聘，称取消非升即走，改预聘+长聘 +24 babu2015 2024-06-18 29/1450 2024-06-22 16:29 by 风今25
[教师之家] 复旦夏同学退学理由说明，哪儿可以下载？ +6 苏东坡二世 2024-06-21 7/350 2024-06-22 13:50 by chemhua
[基金申请] 自然基金变化？？ +13 今晚推荐22 2024-06-21 22/1100 2024-06-22 11:47 by Nano-Firefly
[精细化工] 切削液交流群 +7 SZ吴彦祖 2024-06-17 7/350 2024-06-22 08:54 by gemini_li
[博后之家] 在国内某高校做全职博士后2年，现在找到新的单位，出站或退站对新工作有什么影响？ +10 nxplfcc 2024-06-20 10/500 2024-06-22 07:52 by 徐长安
[有机交流] 锌粉还原反应 20+4 明宝栋 2024-06-17 6/300 2024-06-22 02:29 by hwalle
[硕博家园] 豫北虫友互识 +13 xuhongli903 2024-06-18 14/700 2024-06-21 18:24 by 雨后春笋！
[论文投稿] 投稿求助 6+3 小短腿安琪拉 2024-06-19 4/200 2024-06-20 17:40 by 不一样烟火12345
[海外博后] 墨尔本大学博后offer要不要接 +3 kyxblmm 2024-06-18 3/150 2024-06-19 22:39 by blake1111
[高分子] 烧瓶内合成聚酯 +3 大帝国乐 2024-06-17 7/350 2024-06-18 11:10 by 大帝国乐
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭