应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于菌落PCR
131/2返回列表12下一页
查看: 2265  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

weiminhb

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于菌落PCR 已有11人参与

前几天做了一次菌落PCR，菌里有质粒，我是想验证质粒有没有转进去，结果没有扩增出目标条带，以质粒为模板进行对照，有目标条带。这是什么原因呢？这个质粒是低拷贝的，望高人指点。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-07-29 15:47:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louli

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-07-29 19:35:42
你的描述有点模糊
你的意思是：挑单菌落要的菌液直接PCR没有带是吗？如果这样的话可能是假阳性！
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-07-29 17:28:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiminhb

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by louli at 2010-07-29 17:28:56:
你的描述有点模糊
你的意思是：挑单菌落要的菌液直接PCR没有带是吗？如果这样的话可能是假阳性！

我是直接从斜面上挑菌做的菌落PCR，没有扩增出目标条带。而以质粒为模板，扩增出了目标条带
赞一下 回复此楼
3楼2010-07-29 18:08:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongyanna

金虫 (正式写手)
学习学习啊，呵呵呵
赞一下 回复此楼
自己的路，自己快乐的走
4楼2010-07-29 19:16:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

noheartman

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-29 19:35:54
菌落PCR如果没有扩增出目的片段，那就是重组质粒没有转进去
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-07-29 19:20:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
转染失败的可能性比较大
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-07-29 20:12:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huofuman

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能是没有转进去，多挑几个菌落做看看
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-07-29 20:56:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louli

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-30 08:19:06
引用回帖:
Originally posted by weiminhb at 2010-07-29 18:08:49:




   我是直接从斜面上挑菌做的菌落PCR，没有扩增出目标条带。而以质粒为模板，扩增出了目标条带

你是说提完质粒之后PCR有带是吗？但是我觉得菌液PCR的性质跟质粒PCR一样。你提完质粒之后跑胶了吗？有带吗？我做的时候出现了质粒没带，质粒PCR有带。这可能是因为PCR特性太强了！
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2010-07-30 07:47:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoru2010

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by weiminhb at 2010-07-29 15:47:14:
前几天做了一次菌落PCR，菌里有质粒，我是想验证质粒有没有转进去，结果没有扩增出目标条带，以质粒为模板进行对照，有目标条带。这是什么原因呢？这个质粒是低拷贝的，望高人指点。

你的片段多大？连接了多久？应该是没连接上，我之前也遇到过，后来1000以上的片段都连接24小时才可以的
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-07-30 08:44:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
挑菌落，提质粒，酶切验证~这是最有说服力的~PCR不具备说服力，
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-07-30 11:58:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 weiminhb 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:29 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 19:35 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:35 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 19:13 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:29 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:07 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 11/550 2026-08-30 06:00 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +4 349506619 2026-08-28 4/200 2026-08-29 22:41 by alongwaytogo
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭