24小时热门版块排行榜    

查看: 2865  |  回复: 17

yeshui

铁虫 (小有名气)

[求助] 菌落PCR筛选

将片段与载体连接后,转化DH5α,LB板含有抗生素,结果菌落长的特别少,而且只是在边上长,进行菌落PCR筛选,结果都有目的条带,但是,经过筛选的菌落划到另一块涂有抗生素的LB平板上却不长,是怎么回事呢?我感觉自己图的板还算均匀
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
抗生素浓度是否合适?
质粒是否丢了?
try again
god bless
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2012-02-26 21:37:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biotech_100

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是抗生素浓度的问题吧!边上能长出来,可能是因为培养基中抗生素没混匀好吧,所以只有边上能长。两次的LB培养基都是同一批倒的平板吗?
3楼2012-02-26 22:40:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yguang

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你要扩的片段DH5α里有吗,这是个比较愚蠢的问题,但好多新手都会忽略。
4楼2012-02-27 00:28:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongqifei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
摇个菌,提个质粒,酶切一下先。平板的抗性注意别弄错。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

何须剑道争锋?千人指,万人封,可问江湖鼎峰,三尺秋水尘不染,天下无双。
5楼2012-02-27 09:41:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天鸟

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yguang at 2012-02-27 00:28:37:
你要扩的片段DH5α里有吗,这是个比较愚蠢的问题,但好多新手都会忽略。

用的载体的引物扩增,一般不会出现你说的DH5a里有的情况吧
快乐生活,我快乐
6楼2012-02-27 09:48:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

yeshui

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 天使托 at 2012-02-26 21:37:07:
抗生素浓度是否合适?
质粒是否丢了?
try again
god bless

我一直都用那个浓度啊,做了两次了,而且是三个载体一块做的啊,奇怪了
7楼2012-02-27 11:15:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yeshui

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by biotech_100 at 2012-02-26 22:40:02:
应该是抗生素浓度的问题吧!边上能长出来,可能是因为培养基中抗生素没混匀好吧,所以只有边上能长。两次的LB培养基都是同一批倒的平板吗?

两批板啊,我的抗生素是先倒板再涂布抗生素,然后再涂布菌,以前都那样图,感觉不是没涂匀
8楼2012-02-27 11:17:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yeshui

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by yguang at 2012-02-27 00:28:37:
你要扩的片段DH5α里有吗,这是个比较愚蠢的问题,但好多新手都会忽略。

没有的话,做PCR怎么会扩出来呢,我就是不明白,请指教啊
9楼2012-02-27 11:18:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yeshui

铁虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by hongqifei at 2012-02-27 09:41:44:
摇个菌,提个质粒,酶切一下先。平板的抗性注意别弄错。

确定抗性没弄错,摇哪个菌啊?
10楼2012-02-27 11:19:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yeshui 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 333求调剂 +5 87639 2026-03-21 7/350 2026-03-21 19:31 by ColorlessPI
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 工科0856求调剂 +3 沐析汀汀 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:30 by 学员8dgXkO
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 310求调剂 +3 baibai1314 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:56 by JourneyLucky
[考研] 机械专硕299求调剂至材料 +3 kkcoco25 2026-03-16 4/200 2026-03-21 03:52 by JourneyLucky
[考研] 材料 336 求调剂 +3 An@. 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:39 by JourneyLucky
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂(0805) +14 烟汐忆海 2026-03-16 25/1250 2026-03-20 15:47 by yuncha
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
信息提示
请填处理意见