应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】农杆菌菌落
151/2返回列表12下一页
查看: 3579  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

695

木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】农杆菌菌落 已有10人参与

大家好，想请教下在做转基因的朋友们关于农杆菌！构建好的质粒转进去农杆菌感受态EHA105里，平板是YEB, RIF抗性和质粒的Spec抗性筛选，想问问这个菌落长出来应该有什么特征，看网上有人说偏黄色，菌面有点粘，易扎堆，感觉都不是主要特征，我现在的板子因为加了利福平之后，整个板子都是偏黄的，看着菌落几乎是白色的，这样的算正常吗？菌落PCR验证是对的。谢谢
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸方面

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-06-30 19:05:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+5):欢迎发帖交流！ 2010-06-30 20:30:34
农杆菌菌落稍微有点黄，但是和加了利福平的板子比起来肯定要浅多了，比大肠杆菌菌落颜色深。

PCR验证对的话应该没什么问题，可以提质粒酶切鉴定一下，不过农杆菌质粒不太好提。

加了利福平的话一般不会有杂菌的
赞一下(3人) 回复此楼
2楼2010-06-30 19:56:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励交流 2010-06-30 21:55:17
板子发黄主要是培养基和抗生素的颜色，菌落生长两天后一般就很大了，菌落透明，比较湿润。。。。
你的质粒spe抗性，什么质粒啊，我的质粒也有spe抗性的。。。。
赞一下(2人) 回复此楼
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-06-30 21:32:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

695

木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-06-30 19:56:18:
农杆菌菌落稍微有点黄，但是和加了利福平的板子比起来肯定要浅多了，比大肠杆菌菌落颜色深。

PCR验证对的话应该没什么问题，可以提质粒酶切鉴定一下，不过农杆菌质粒不太好提。

加了利福平的话一般不会有杂 ...

多谢回复，祝一切顺利！
赞一下 回复此楼
4楼2010-07-01 00:39:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

695

木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-06-30 21:32:47:
板子发黄主要是培养基和抗生素的颜色，菌落生长两天后一般就很大了，菌落透明，比较湿润。。。。
你的质粒spe抗性，什么质粒啊，我的质粒也有spe抗性的。。。。

哦，谢谢你的回复，我是从人家手里要的一个专门做GATEWAY CLONE的目的载体
赞一下 回复此楼
5楼2010-07-01 00:40:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanzou2011

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by fungixx at 2010-06-30 21:32:47
板子发黄主要是培养基和抗生素的颜色，菌落生长两天后一般就很大了，菌落透明，比较湿润。。。。
你的质粒spe抗性，什么质粒啊，我的质粒也有spe抗性的。。。。

请问下spec的中文全称是什么？谢了
赞一下 回复此楼
6楼2013-06-30 20:44:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Spectinomycin 壮观霉素
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
7楼2013-06-30 20:53:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanzou2011

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by starseacow at 2013-06-30 20:53:50
Spectinomycin 壮观霉素

多谢回复！还想问下就是我的重组质粒转入农杆菌EHA105，平板是抗利福平和Spec,长了2天了，只看到有两三个小小的透明的菌落，那个是农杆菌吗？而且我将这些菌落转到Rif, Kam, Hyo的液体培养基培养过夜，还是好稀，是不是时间太短了。
赞一下 回复此楼
8楼2013-06-30 21:00:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-01 09:18:14
引用回帖:
8楼: Originally posted by yuanzou2011 at 2013-06-30 21:00:31
多谢回复！还想问下就是我的重组质粒转入农杆菌EHA105，平板是抗利福平和Spec,长了2天了，只看到有两三个小小的透明的菌落，那个是农杆菌吗？而且我将这些菌落转到Rif, Kam, Hyo的液体培养基培养过夜，还是好稀，是 ...

首先检查你使用的抗生素是否正确，另外，配置抗生素的时候最好过滤除菌，没有问题的话，只有几个透明菌落也不奇怪，很可能你的感受态菌状态不好，效率偏低。液体培养的话，我的经验是28-30度过夜，可以长得很浑浊。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
9楼2013-07-01 00:26:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crace

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好！请问你的Spec抗性筛选时，使用的浓度是多少呢？为什么我转化农杆菌用spec筛选时总长成菌片？多谢！
赞一下 回复此楼
10楼2014-12-29 14:22:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 695 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +14 一样YWY 2026-04-06 14/700 2026-04-08 23:00 by 猪会飞
[考研] 318求调剂 +13 ykyhsa 2026-04-05 15/750 2026-04-08 21:37 by wj165256
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +21 额cc 2026-04-06 22/1100 2026-04-08 18:33 by 环化材-小生
[考研] 327求调剂 +12 Xxjc1107. 2026-04-06 12/600 2026-04-08 16:46 by luoyongfeng
[考研] 求材料调剂，一志愿郑州大学289分 +21 硕星赴 2026-04-03 21/1050 2026-04-08 11:55 by 猪会飞
[考研] 一志愿西南090202求调剂 +4 在线求有学上 2026-04-07 4/200 2026-04-07 19:47 by biomichael
[考研] 325 调剂 +6 QQ小虾 2026-04-07 6/300 2026-04-07 15:17 by Ccclqqq
[考研] 26自然地理学303分求调剂 +4 一战成硕啊啊啊� 2026-04-06 9/450 2026-04-06 20:35 by lin-da
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 生物学求调剂 +5 15064154688 2026-04-03 5/250 2026-04-06 11:56 by lijunpoly
[考研] 生物与医药086000调剂一志愿西北农林320分 +3 美美女士 2026-04-03 3/150 2026-04-05 21:55 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿9材料学硕297已过六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-04-04 12/600 2026-04-05 19:04 by 蓝云思雨
[考研] 313求调剂 +5 海日海日 2026-04-04 7/350 2026-04-05 13:58 by imissbao
[考研] 考研调剂 +3 mcbbc 2026-04-04 3/150 2026-04-05 10:03 by barlinike
[考研] 能动调剂326专硕 +4 wan112233 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:47 by yu221
[考研] 306求调剂 +3 hyb上名工 2026-04-02 3/150 2026-04-04 18:12 by 热情沙漠
[考研] 305求调剂 +3 77Qi 2026-04-03 3/150 2026-04-03 23:01 by qzxyhcsy
[考研] 338求调剂 +7 晟功? 2026-04-03 7/350 2026-04-03 16:46 by wxiongid
[考研] 315求调剂 +6 顺理成张 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:04 by 百灵童888
[考研] 260求调剂 +6 朱芷琳 2026-04-02 6/300 2026-04-02 20:27 by 6781022
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭