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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】农杆菌菌落
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haixie_scau

铁虫 (初入文坛)
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引用回帖:
10楼: Originally posted by crace at 2014-12-29 14:22:48
你好！请问你的Spec抗性筛选时，使用的浓度是多少呢？为什么我转化农杆菌用spec筛选时总长成菌片？多谢！

因为有的EHA105本身就抗spec+rif+strep.
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11楼2015-01-27 12:05:37
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zj251989

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
您好？请问下您如何检测革兰氏阳性菌中的重组质粒？是直接做菌落PCR还是提取质粒，具体的方法您知道吗？
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12楼2015-08-04 08:15:05
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ZYYLY

新虫 (初入文坛)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by ben1147 at 2010-06-30 19:56:18
农杆菌菌落稍微有点黄，但是和加了利福平的板子比起来肯定要浅多了，比大肠杆菌菌落颜色深。

PCR验证对的话应该没什么问题，可以提质粒酶切鉴定一下，不过农杆菌质粒不太好提。

加了利福平的话一般不会有杂菌 ...

最近一直做将重组载体转农杆菌感受态，为什么一直提不出质粒呢，平板长了不少菌，一个也没有提出来。还有在做YEP固体平板的时候也要加利福平吗，我只加了kan.谢谢，
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13楼2017-08-12 11:17:34
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一叶知秋365

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by crace at 2014-12-29 14:22:48
你好！请问你的Spec抗性筛选时，使用的浓度是多少呢？为什么我转化农杆菌用spec筛选时总长成菌片？多谢！

用200试试~

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14楼2017-08-13 00:25:01
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一叶知秋365

新虫 (小有名气)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by ZYYLY at 2017-08-12 11:17:34
最近一直做将重组载体转农杆菌感受态，为什么一直提不出质粒呢，平板长了不少菌，一个也没有提出来。还有在做YEP固体平板的时候也要加利福平吗，我只加了kan.谢谢，...

用的什么方法提的？

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15楼2017-08-13 00:25:44
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