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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】农杆菌菌落
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695

木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】农杆菌菌落 已有10人参与

大家好，想请教下在做转基因的朋友们关于农杆菌！构建好的质粒转进去农杆菌感受态EHA105里，平板是YEB, RIF抗性和质粒的Spec抗性筛选，想问问这个菌落长出来应该有什么特征，看网上有人说偏黄色，菌面有点粘，易扎堆，感觉都不是主要特征，我现在的板子因为加了利福平之后，整个板子都是偏黄的，看着菌落几乎是白色的，这样的算正常吗？菌落PCR验证是对的。谢谢
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1楼 2010-06-30 19:05:53
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zj251989

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
您好？请问下您如何检测革兰氏阳性菌中的重组质粒？是直接做菌落PCR还是提取质粒，具体的方法您知道吗？
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12楼2015-08-04 08:15:05
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ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+5):欢迎发帖交流！ 2010-06-30 20:30:34
农杆菌菌落稍微有点黄，但是和加了利福平的板子比起来肯定要浅多了，比大肠杆菌菌落颜色深。

PCR验证对的话应该没什么问题，可以提质粒酶切鉴定一下，不过农杆菌质粒不太好提。

加了利福平的话一般不会有杂菌的
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2楼2010-06-30 19:56:18
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励交流 2010-06-30 21:55:17
板子发黄主要是培养基和抗生素的颜色，菌落生长两天后一般就很大了，菌落透明，比较湿润。。。。
你的质粒spe抗性，什么质粒啊，我的质粒也有spe抗性的。。。。
赞一下(2人) 回复此楼
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-06-30 21:32:47
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695

木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-06-30 19:56:18:
农杆菌菌落稍微有点黄，但是和加了利福平的板子比起来肯定要浅多了，比大肠杆菌菌落颜色深。

PCR验证对的话应该没什么问题，可以提质粒酶切鉴定一下，不过农杆菌质粒不太好提。

加了利福平的话一般不会有杂 ...

多谢回复，祝一切顺利！
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4楼2010-07-01 00:39:48
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