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695

木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】农杆菌菌落 已有10人参与

大家好,想请教下在做转基因的朋友们关于农杆菌!构建好的质粒转进去农杆菌感受态EHA105里,平板是YEB, RIF抗性和质粒的Spec抗性筛选,想问问这个菌落长出来应该有什么特征,看网上有人说偏黄色,菌面有点粘,易扎堆,感觉都不是主要特征,我现在的板子因为加了利福平之后,整个板子都是偏黄的,看着菌落几乎是白色的,这样的算正常吗?菌落PCR验证是对的。谢谢
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crace

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好!请问你的Spec抗性筛选时,使用的浓度是多少呢?为什么我转化农杆菌用spec筛选时总长成菌片?多谢!
10楼2014-12-29 14:22:48
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+5):欢迎发帖交流! 2010-06-30 20:30:34
农杆菌菌落稍微有点黄,但是和加了利福平的板子比起来肯定要浅多了,比大肠杆菌菌落颜色深。

PCR验证对的话应该没什么问题,可以提质粒酶切鉴定一下,不过农杆菌质粒不太好提。

加了利福平的话一般不会有杂菌的
2楼2010-06-30 19:56:18
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励交流 2010-06-30 21:55:17
板子发黄主要是培养基和抗生素的颜色,菌落生长两天后一般就很大了,菌落透明,比较湿润。。。。
你的质粒spe抗性,什么质粒啊,我的质粒也有spe抗性的。。。。
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-06-30 21:32:47
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695

木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-06-30 19:56:18:
农杆菌菌落稍微有点黄,但是和加了利福平的板子比起来肯定要浅多了,比大肠杆菌菌落颜色深。

PCR验证对的话应该没什么问题,可以提质粒酶切鉴定一下,不过农杆菌质粒不太好提。

加了利福平的话一般不会有杂 ...

多谢回复,祝一切顺利!
4楼2010-07-01 00:39:48
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