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媛媛yang新虫 (初入文坛)
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农杆菌菌液PCR没有结果 已有6人参与
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第一次菌液PCR,用农杆菌做菌液PCR,菌液1是保存在冰箱中一周,菌液2是新鲜摇的菌,3和4是质粒,结果,1,2,3没有条带,只有4有目的条带,且有很多杂带。目的条带800bp左右。 PCR条件是94℃,5min; 94℃,1min; 61℃,1min; 72℃,2min; 72℃,10min 请问是不是我的PCR条件有问题?请指教! |
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5楼2011-04-22 09:21:18
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今天重新做了菌液PCR,我把菌液100微升煮了15min,离心取上清,加样1微升,结果加样孔特别的亮,这种是什么情况?为什么每次都有新现象? 我的体系: 10*PCR Buffer 2.5 10mM dNTP 1 Taq 0.2 10微M 引物1 1 引物2 1 菌液 1 水 18.3 Total 25 我的条件 94 10min 94 1min 61 1min 72 30sec 72 10min 30个循环 目的条带800bp左右,但是煮过的样品在marker最大条带后面有一个条带,marker最大的条带是1500,请问这是怎么回事?这个条带是怎么回事呢? 请指教!请指教! |
3楼2011-04-21 18:13:54
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