24小时热门版块排行榜    

查看: 2281  |  回复: 3
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看

billy8580

新虫 (初入文坛)

[交流] 请教:菌液pcr带总是很弱,为什么? 已有3人参与

各位战友们,
     我p一个基因,回收连接转化,挑菌摇菌,做菌液pcr鉴定,不知道为什么,每次菌液pcr的带很弱很弱,不仔细看,都看不出来,我就选了一管菌液测序,测出的结果是正确的,是我想要的东西。这整个流程已经重复四次了,每次都是这样,不知为什么?菌液摇的也很浓,pcr循环数都在30以上,我p其他片段时,从来没有这种现象。请问这是什么情况?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨中的雕塑

银虫 (小有名气)

1949stone: 手机回复 鼓励 2011-07-11 10:14:16
胶浓度有关。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
我愿天下人:人人得以智慧之光,去开启生命之真谛
2楼2011-07-11 07:48:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(EPI+1): 给力的天使 2011-07-11 10:13:51
弱没有关系,只要有而且测序准确就没有什么问题;
你PCR结果很弱可能原因有以下几点(个人分析):
1:菌的浓度太大了,导致酶的作用部分丧失,这完全有可能;
2:PCR体系不合适;
3:退火温度的选择不当,这一点很有可能的,因为你循环次数都30次以上了,如果退火温度选择合适,我觉得应该是比较亮的;
4:延伸时间的选择,不知道你的片段多大?如果大片段,你延伸的时间段也会出现条带弱的情况的。

所以自己慢慢一步一步找原因,然后解决问题,加油!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-07-11 09:12:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

herethere

铁虫 (文坛精英)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
可能菌液加入的量对PCR体系产生影响,需要摸摸条件。。。
The future belongs to those who believe in the beauty of their dreams
4楼2011-09-23 20:29:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 billy8580 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见