请教：菌液pcr带总是很弱，为什么？ - 分子生物 - 综合其他

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天使托

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T.Shen

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone(EPI+1): 给力的天使 2011-07-11 10:13:51

弱没有关系，只要有而且测序准确就没有什么问题；
你PCR结果很弱可能原因有以下几点（个人分析）：
1：菌的浓度太大了，导致酶的作用部分丧失，这完全有可能；
2：PCR体系不合适；
3：退火温度的选择不当，这一点很有可能的，因为你循环次数都30次以上了，如果退火温度选择合适，我觉得应该是比较亮的；
4：延伸时间的选择，不知道你的片段多大？如果大片段，你延伸的时间段也会出现条带弱的情况的。

所以自己慢慢一步一步找原因，然后解决问题，加油！